注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
仅供科研实验、不得用于临床
产品名称 |
规格 |
货号 |
班氏试剂 |
100ml |
FS-R7725 |
分类:生化检测
储存条件:室温,12个月
用途:可用于检测还原糖或尿葡萄糖定性实验
注意事项:又称本尼迪克特试剂,由柠檬酸钠、碳酸钠、硫酸铜等组成
标准溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基 100mL芝麻酚(>98%,BC)质量规格:>98%,BCSesamol
MLTC-1小鼠间质细胞瘤细胞 MLTC-1 mouse Leydig cell tumor RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS粗孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade)质量规格:20-60目,层析用Silica gel for column chromatography
IL22 Protein Human 重组人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白粗孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade)质量规格:100-200目,层析用Silica gel for column chromatography
SK-NEP-1(人肾母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 PT-67(病毒转染小鼠细胞)粗孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)质量规格:300-400目,层析用Silica gel for column chromatography
CL-0020Acc-2(人涎腺腺样囊性癌细胞)5×106cells/瓶×2氧化前胡素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Oxypeucedanin
HBL-100细胞,整合SV40基因的上皮细胞 人结直肠腺癌细胞,HCT-15细胞 CM-R021大鼠胰腺上皮细胞完全培养基100mL录化镧1克
大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5肠激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用试剂
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 异务全;3-基丁全;异缬草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3
人脐动脉内皮细胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二钠盐shēng huà shì jì容量:1克
ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 503-66-23-羟基酸(含数量不等3,3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
班氏试剂人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺(标准品)Proglumide质量规格:含量测定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)质量规格:>98%,高度选择性的PPARβ/δ激动剂
牛胚气管细胞;EB (NBL-4)布洛芬(标准品)Ibuprofen质量规格:含量测定
A172细胞,胶质母细胞瘤细胞 肝细胞癌,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205比沙可啶(标准品)Bisacodyl质量规格:含量测定
小鼠肉瘤瘤株;S180醋酸氯己定(标准品)Chlorhexidine Acatate质量规格:含量测定
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,使用浓度为50-1000μg/mL。对于*次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定*筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) *天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养*;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,*将细胞稀释至丰度不过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。