注意事项:
a.尽量减少反复冻融的次数,以免失效。 产品仅供科研实验、不得用于临床
b.基因转染到细胞内要一段时间才能表达出蛋白质, 所以筛选不能太早。
c. 筛选也不宜太迟,一般要在转染24h之后才开始加G418筛选。因为转染了外源基因
的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,*终导致筛选不出阳性克隆。
4. 随着细胞代谢,G418的浓度和活性都会下降,应每3~5天更换一次含有G418的筛选液,这时药物浓度可以降至200μg/ml。
5.加药筛选约5~7天左右,细胞会大量死亡,为了减少死亡细胞对阳性克隆的不利影响以及增加阳性克隆的得到率,可以应用套环法或刮除法结合有限稀释法来筛选阳性克隆。加药后,在高倍镜下,刮除阴性克隆,消化阳性克隆后继续筛选培养。或者用套环套住阳性克隆,在套环内加胰蛋白酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一个新的孔中培养,*再用有限稀释法把阳性克隆在96孔板中筛选。
6. 一般经过4周左右的筛选,得到的阳性克隆都比较稳定。但是外源基因如果没有整合到基因组中的话,目的基因还是很容易丢失的,再次筛选往往是必不可少的,经过2次以上的筛选之后才能找到遗传稳定的细胞克隆。
7.尽量避免污染。
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品属性:
产品名称:Molisch试剂
规格:100ml
货号:FS-R7729
分类:生化检测
储存条件:室温,避光,3个月
用途:定性检测醛糖
注意事项:又称莫氏试剂。l
溶液的配制与的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
标准物质的管理:
(一)规范记录:
建立标准物质台帐,定期更新台账,明确责任主体,以便做到可以追本溯源;
领用时,记录好领用时的名称、数量、时间、领用人、发放人等必要的信息;
标准物质应在有效期内使用,应定期检查标准物质的有效期,对于限的标准物质要填写销毁登记表;建立标准物质档案。
(二)定期核查:
对于标准物质的种类、级别、介质、浓度含量、有效期、批号、环境条件、储存方法、帐物相符等等各参数,要定期核查。
定期检查实验室各检测项目所对应的标准物质是否相符。对新增检测项目所对应的标准物质应及时纳入规范管理。
存放环境条件和有效性。按标准物质证书上规定的环境条件,储存方法进行存放,及时检查是否过期。标准物质的储存环境应保证其特性完整不变。
标准物质所用介质和浓度是否满足检测方法对介质的要求。浓度是否合适,所用的介质对分析是否有影响。
小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino东莨菪苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Scopolin
CD69 Others Human 人 CD69 人细胞裂解液 (阳性对照) 东莨菪内酯质量规格:HPLC≥98%,标准品Scopoletin
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32冬凌草甲素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Oridonin
TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 豆腐果苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Helicid
原代肝实质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml丁二酸洛沙平(标准品)质量规格:含量测定Loxapine succinate salt
人癌细胞;MCF 7B1-溴代庚烷250毫克2~8℃
人内壳细胞(HHirSC)( 5×105 );分200目 ChroMiuM 7440-47-3
CL-0447SW 1353(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2茚三酮 Ninhydrin (≥99%, for amino acid detec... 485-47-2 10G 通用试剂
人细胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL肉浸液肉汤培养基25毫升2~8℃
P815 小鼠肥大细胞癌细胞(D-果糖)
Molisch试剂人细胞;C-33A补骨脂宁;补骨脂异黄酮Corylin质量规格:HPLC≥98%,标准品
BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 补骨脂素(标准品)Psoralen质量规格:HPLC≥98%,标准品
人急性T细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)苍术素(标准品)Atractylodin质量规格:HPLC≥98%,标准品
18. 卵巢细胞系统草乌甲素(标准品)Bulleyaconitine A质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-R072大鼠肾管状上皮细胞完全培养基100mL草质素(标准品)Herbacetin质量规格:HPLC≥98%,标准品