将旋毛虫抗原吸附(又称包被)于固相载体，孵育后洗去未吸附的抗原，随后加入含有特异性抗体的被检血清，作用后洗除未起反应的物质，加入酶标记的第二抗体，作用后再洗涤，加入酶底物，底物被分解后出现颜色反应，用酶标仪测定其吸光值(OD)，判定检测结果。此法敏感、特异，我国20世纪80年代至90年代初多用此法检测旋毛虫感染人畜血清抗体。由于旋毛虫幼虫可溶性抗原(即粗抗原)的抗原成分复杂，常有交叉反应和假阳性反应，故近年来多用ES抗原及单抗纯化抗原。Gamble等(1983)应用旋毛虫肌幼虫ES抗原研制出ELISA诊断试剂盒，用单抗纯化后的ES检测猪旋毛虫病，其特异性可达99％。由于该法的特异性强，灵敏度高及操作简便，因此用纯化ES抗原所组装的旋毛虫病ELISA诊断试剂盒在美国己商品化。:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />
由于葡萄球菌蛋白A(SPA)能与人和多种哺乳动物的IgG结合，有较高的敏感性，不受种属特异性的限制，并且制备容易、性质稳定、易纯化，使用更趋方便，故可用以代替间接ELISA中的酶标第二抗体进行间接ELISA，检测旋毛虫抗体。从20世纪90年代开始SPA-ELISA已被广泛应用于旋毛虫的检测。黎世涛等(1991)用ES作抗原建立了更简便适用的旋毛虫病SPAELlSA检测方法。试验表明，对人工感染的猪旋毛虫病阳性检出率达100％，他们又用单克隆抗体纯化的ES抗原建立了快速诊断旋毛虫病的ELISA方法，使整个操作程序可在lOmin内完成。
20世纪90年代以来，Dot-ELISA用于旋毛虫病检测。它是以纤维素薄膜(硝酸纤维素膜或混合纤维素酯微孔滤膜，孔径o．2一o．4um)为固相载体，将抗原或抗体用大头针蘸取印滴吸附在纤维膜表面．通过与相应的抗体或抗原和酶标记抗体的一系列免疫反应，形成酶标记抗原—抗体复合物，再加入底物反应后，呈现出肉眼可见的颜色斑点，而作出结果判定，以达到进一步简化ELISA操作的目的。张光玉(1992)、朱名胜等(2000)试验结果表明该方法具有敏感性高、特异性强、试剂用量少、早期诊断、无需特殊设备、肉眼即可判断结果等优点，适用于旋毛虫病的临床诊断、流行病学调查、动物食品卫生检验。邓瑞广等(2006)用常规镜检法、人工胃液消化法、快速酶联免疫吸附法和Dot—ELISA法进行了对比试验，结果表明Dot-ELlSA法效果好。
