我购买了你们的A095ATP含量测试盒,做的对象是培养细胞。说明书上关于细胞匀浆破碎的实验步骤我刚刚咨询你们的技术,技术简单跟我说了几种方法:超声裂解,匀浆碾磨等,还告诉我不要用细胞裂解液。能否将匀浆破碎的具体操作步骤,用到的仪器等详细说明发给我。麻烦了,谢谢!
回复:
1. 行细胞常规消化离心.上层的细胞培养液若不测任何指标可以弃去.或者用小离心管冷冻保存以备以后测指标用.
2. 离心后的(3500转/分左右)细胞沉淀于离心管底部然后加生理盐水或0.01M/LPH=7.4的PBS作为匀浆介质(一般情况下,将细胞稀释至10的6次方或10的7次方)进行超声匀浆或贴壁式匀浆器进行匀浆,千万不可以用SDS破壁(若用之将严重影响酶的活性)。若老师采用贴壁式匀浆器进行匀浆,可从销售部订购玻璃贴壁式匀浆器。
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