液相色谱仪常见故障处理
发布时间：2018-01-23
1、
流动相内有气泡关闭泵打开泄压阀打开purg键清洗脱气气泡不断从过滤器冒出进入流动相无论打开purge键几次都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内过滤器内部由于霉菌的生长繁殖形成菌团阻塞了过滤器缓冲液难以流畅地通过过滤器空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时轻轻震荡几次再将过滤器用纯水清洗几次打开泄压阀打开purge键清洗脱气如仍有气泡不断从过滤器冒出继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中如没有气泡不断从过滤器中冒出说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀打开泵流速调至1.0～3.0ml/min纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀纯甲醇冲洗半小时即可。
2、柱压高原因
(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;
(2)样品污染沉积。处理对于种情况先用40～50℃的纯水低速正向冲洗柱子待柱压逐渐下降后相应提高流速冲洗柱压大幅度下降后用常温纯水冲洗之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况由样品的沉积引起污染的C18柱和纯水反向冲洗柱子然后换成甲醇冲洗接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)再用换成甲醇冲洗然后用纯水冲洗后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
3、既无压力指示又无液体流过。
(1)泵密封垫圈磨损;
(2)大量气泡进入泵体。处理对于种情况更换密封垫圈;对于第二种情况在泵作用的同时用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
4、压力波动大流量不稳定。
原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底避免吸入空气流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物拆下单向阀放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
5、出峰不佳峰分叉。
(1)色谱柱被污染;
(2)柱头填料塌陷。处理对于种情况先用纯水反向冲洗柱子然后换成甲醇冲洗接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)再换成甲醇冲洗然后用纯水冲洗后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳则考虑第二种情况。对于第二种情况拧开柱头检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料)装入新填料滴一滴甲醇填料下陷再填用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧再填平滴甲醇再压紧反复几次直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净擦净柱外壁的填料拧紧柱头用纯甲醇冲洗30分钟以上。
6、峰面积重复性不佳。
(1)进样阀漏液;
(2)加样针不到位。
处理对于种情况更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态以保证进样量的准确。日常工作中液相色谱仪的保养非常重要如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要任何样品都要尽可能地去除杂质完全溶解尽量减少对色谱柱的污染以延长色谱柱的使用寿命同时避免注射过浓的样品溶液以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
