暗场显微镜的应用
暗视野显微镜在生物学和医学中的应用不是太广泛的。一个重要的原因是，具有廷德尔效应徽粒分析的先决条件是光散射物体必须处于一个完全均质的介质之中，这对于胶体化学和结晶学是非常适合的;但在生物学材料中却很难遇到。因此它只能用于具有规则结构的物体，例如硅藻、放线虫等;或具有线性结构的物体，例如鞭毛、纤维，以及细菌、单细胞浮游生物、悬浮细胞、精子、梅毒螺旋体等非常微小的生物体。
由于暗视野显微镜所形成物像的不可靠性，因此随着相差显微镜的出现使得它的应用范围逐步缩小;但是，暗视野照明同荧光显徽镜的结合为暗视野照明的使用开辟了广阔的前景。
暗视野显微镜的装配是非常方便的，只要在一般透射显徽镜中换上暗视野集光器，配合适当的物镜就成为一台暗视野显微镜。
暗视野显微镜在使用中应注意以下几个问题:
( 1)使用暗视野集光器时，必须注意集光器的内限孔径大于所用物镜孔径大约0.1，否则将不会产生暗视野效果。现在一般常用的暗视野集光器有两种型号，低孔径干系集光器(D 0.80--0.95)应该与孔径小于0.75的物镜相配用;高孔径浸润集光器( D 1.20^-1.40 )应该与孔径大于0.75的高倍干系物镜或浸润物镜相配用，当物镜的数值孔径太大时(大于1.10)，可用带有孔径光阑的物镜或在物镜中插入一个漏斗状光阑，以减小物镜的数值孔径。
(2)使用数值孔径高于1.20的暗视野集光器时，必须使用集光器浸润，即在集光器顶与载玻片之间滴上浸油。否则，照明光线会在集光器上进行全反射，达不到标本上，从而得不到暗视野照明。
(3)必须对暗视野集光器进行严格的调中，并且准确地进行集光器的垂直调节，以使得集光器的照明焦点对准被观察的物体平面，即照明场与显微镜视场完全重合。
(4)用于暗视野显微镜的载玻片、盖玻片和集光器透镜表面必须避免划痕，并且要完全避免灰尘，任何划痕和杂物都会严重地扰乱终的像。载玻片厚度应该在0.9-^-1.1mm之间，如果载玻片太厚，光线将被聚焦在玻片内而不是标本平面，于是不能得到正确的暗视野。对于0.17mm的盖玻片厚度的要求比较严格，随着孔径的增大，盖玻片厚度误差对像的质量的影响将愈来愈大。
(5)用于观察的标本一定不能太厚，否则暗视野中的反差将被降低，并且物体I显得特别亮，同样，标本的密度也不能太大，标本也不能包含太多的光衍射微粒，在暗视野显微观察中不适于用染色标本。
