成份 (g/L)
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特殊营养物质 |
47.55 |
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显色剂 |
0.35 |
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琼脂 |
13.0 |
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pH 7.0-7.2 25 ℃ |
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要过 1 分钟。分装三角瓶， 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心，倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ，混匀，凝固后， 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ～ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时，倾入无菌平皿，琼脂完全凝固后，在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时，加入适当稀释度的样品液 1ml ，涂布于培养基上， 36 ± 1 ℃培养 18 ～ 24h 。
贮存
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培养基过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1 、按标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h ，选用有 30 ～ 200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
大肠菌群 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上， 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h 小时：
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质控菌株 |
ATCC |
生长情况 |
菌落颜色 |
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单增李氏菌 |
27853 |
-/+ |
无色 |
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金黄色葡萄球菌 |
25923 |
-/+ |
无色 |
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大肠杆菌 |
25922 |
+++ |
蓝色 |
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沙门氏菌 |
+++ |
无色 |
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大肠菌群 |
+++ |
蓝色 |
方法的局限性
本培养基鉴定 大肠菌群 ，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
参考文献
• FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
• KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
