大肠菌群显色培养基

发布时间:2017-02-20

大肠菌群显色培养基
Coliform Chromogenic Medium

 
用途:用于快速、准确检测大肠菌群,培养24小时,大肠菌群显蓝绿色
肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。

成份 (g/L)

特殊营养物质

47.55

显色剂

0.35

琼脂

13.0

pH 7.0-7.2 25 ℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得佳的结果。

注意

此培养基仅供实验室使用。

用法

称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要过 1 分钟。分装三角瓶, 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ,混匀,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ~ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。

贮存

制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。

失效

干燥培养基过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

操作步骤

1 、按标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液

2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上

3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。

大肠菌群 = 蓝绿色菌落

4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。

质量控制

1 、外观

此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。

2 、微生物试验

在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h 小时:

质控菌株

ATCC

生长情况

菌落颜色

单增李氏菌

27853

-/+

无色

金黄色葡萄球菌

25923

-/+

无色

大肠杆菌

25922

+++

蓝色

沙门氏菌

+++

无色

大肠菌群

+++

蓝色

方法的局限性

本培养基鉴定 大肠菌群 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。

典型特征

大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。

参考文献

•  FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).

•  KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).

LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).
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