桔梗药材桔梗皂苷D检测方式

桔梗药材（桔梗皂苷D）检测方式 桔 梗Jiegeng RADIX PLATYCODONIS本品为桔梗科植物桔梗Platycodon gradiflorum (Jacq.) A. DC.的干燥根。春、秋二季采挖，洗净，除去须根，趁鲜剥去外皮或不去外皮，干燥。【性状】本品呈圆柱形或略呈纺锤形，下部渐细，有的有分枝，略扭曲，长7～20cm，直径0.7～2cm。表面白色或淡黄白色，不去外皮者表面黄棕色至灰棕色，具纵扭皱沟，并有横长的皮孔样斑痕及支根痕，上部有横纹。有的顶端有较短的根茎或不明显，其上有数个半月形茎痕。质脆，断面不平坦，形成层环棕色，皮部类白色，有裂隙，木部淡黄白色。气微，味微甜后苦。【鉴别】（1）本品横切面：木栓细胞有时残存，不去外皮者有栓皮层，细胞中含草酸钙小棱晶。栓内层窄，常见裂隙。韧皮部乳管群散在，壁略厚，内含微细颗粒状黄棕色物。形成层成环。木质部导管单个散在或数个相聚，呈放射状排列。薄壁细胞含菊糖。（2）取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶.（3）取本品粉末1g，加7%硫酸乙醇-水(1:3)混合液20ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙醚（2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 水分　不得过15.0%（Ⅸ H法）。灰分 不得过6.0%（附录Ⅸ K）。【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录Ⅹ A）测定，用乙醇作溶剂，不得少于17.0%。【含量测定】照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－水（25:75）为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备 取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过二号筛）约2.0g，精密称定，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置水浴上蒸干，残渣加水20ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液50ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇3ml使溶解，加硅胶0.5g拌匀，置水浴上蒸干，加于以三氯甲烷-甲醇（9:1）制备的硅胶柱（内径2cm，10g）上，以三氯甲烷-甲醇（9:1）50ml洗脱，弃去洗脱液，再以三氯甲烷-甲醇-水（60:20:3）100ml洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水（60:29:6）100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10～15μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含桔梗皂苷D（C57H92O28）不得少于0.10%。