由于每种细胞对G418的敏感性不同，而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同，所以在筛选之前，一定要确定G418的佳筛选浓 度。尽管文献上说特性明确的细胞系G418的佳用量还是稳定的，
但是由于实验室的培养方式、传代的影响，该细胞系的遗传性状是否稳定很难说，要踏踏实实的做，摸索方法还是很简单的：将细胞稀释至1000cell/ml，
每孔100l加入有培养基的 24孔板，将每孔中的G418浓度稀释至0，100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000，1100g/ml 等12个级别，培养10-14天，以低细胞全部死亡浓度为基准，
一般400-800左右，筛选时比该浓度再高一个级别，维持使用筛选浓度的一半。不同的质粒转染同一种细胞，筛选的G418浓度是一样的，但是否都能筛选得到稳定株就很难说了，
G418 G418是一种氨基糖苷类抗生素 这种氨基糖类抗生素的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似，在分子遗传试验中是稳定转染常用的抗性筛选试剂。它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因
干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成对原核和真核等细胞产生毒素 包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞
也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 则能启动neo基因编码的序列转录为ｍＲＮＡ 从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达
使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。
Ｇ418的这一选择特性 已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
G418使用方法 室温下运输 干粉在室温下储存，溶于水、甲醇，溶液于-20℃储存 由于各真核细胞系对G418敏感度不同各新细胞系或株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量需要通过实验优化。
适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml，每孔100ul加入有培养基的24孔板，将每孔中的G418浓度稀释至010020030040050060070080090010001100ug/ml等12个级别 培养10-14天，
以低细胞全部死亡浓度为基准，一般400-800左右，筛选时比该浓度再高一个级别，维持时使用筛选浓度的一半即可
