大鼠I型胶原(collagen I)ELISA试剂盒操作步骤

大鼠I型胶原(collagen I)ELISA试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

 

800ug/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
400ug/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
200ug/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
100ug/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
50ug/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

 

1. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

本公司长期供应高品质ELISA试剂盒，种属齐全有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有可检测人源、小鼠、大鼠、豚鼠、猪、狗、猴、羊、牛、鸡、兔等各种样本的科研试剂盒。客户使用劲马生物产品的同时，可以享受本公司完善的售后服务和技术支持。