培养细胞一代生存期
“ 一代”指细胞接种到分离再培养的所用的时间。与细胞倍增一代不是一个含义。在细胞一代中，细胞能倍增3～6次，经历三个阶段： 细胞增殖
1. 潜伏期(latent phase) ：
接种 经过 悬浮期(细胞质回缩胞体呈圆球形) 贴壁。
初代培养细胞 经过 10～24小时或更多时间。
连续细胞系和癌细胞系 经过 10～30分钟 贴附。
贴附现象是一个非常复杂和受多种因素的影响。
影响细胞贴附：底物表面不干净，影响细胞贴附。
利于细胞贴附：底物表面带有阳性物质与特殊物质:
纤粘连蛋白(fibronectin FN)、
细胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
这些物质有的存在与细胞表面有的来自血清。
潜伏期特点：
长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。
(1)细胞贴附后进入潜伏期细胞无增殖。少见分裂相，细胞有运动活动。
(2)初代培养 细胞潜伏期约为24～96小时或更长，
连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6～24小时。
(3)细胞接种密度大潜伏期短。
(4)细胞出现分裂相增多时，标志细胞进入指数增生期。
2．指数增生期(logarithmic growth phase)：
特点：细胞增殖旺盛阶段分裂相增多。
细胞分裂指数(mitotie index MI) ：
表示每1000个细胞中的分裂相数。
条件：分裂相数与细胞种类、培养成分、pH培养箱温度有关。
细胞分裂指数：
初代细胞：在0.1％～0.5％之间％
连续分裂细胞和肿瘤细胞：3 ～5％。
指数增生期是作为细胞一代活力好的时期是进行实验好和主要的阶段。
指数增生期持续3～5天，细胞数量增多后生长空间变小，细胞相互接触可连接成片。
正常细胞：细胞相互接触能抑制细胞运动，这种现象称为接触抑制(contact inhibition)。
肿瘤细胞：没有这种现象，可作为区别正常与肿瘤细胞的标志。当肿瘤细胞达到一定密度后向三维空间发展，使细胞发生堆积(piled up)。
由于细胞不断增殖分裂，细胞数量持续增多，培养液的营养成分减少，代谢产物增多，细胞受营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制(Density inhibition)导致细胞分裂停止。
3.停滞期(stagnate phase)
细胞量和密度达到饱和，细胞停滞增殖。表明细胞进入到停滞期细胞数量持平，也称为平顶期(plateau）。
特点：细胞不增殖有代谢活动。培养液中的营养已逐渐耗尽代谢产物积累增多pH降低，此时需要传代否则细胞将会中毒发生形态改变细胞会从底物脱落死亡.
