1. 姬姆萨（Giemsa）染液的配制
2. 瑞氏（Wright′s）染液的配制
显微镜，香柏油，载玻片，盖玻片，玻片水平支架，采血针或注射器，计数器，小滴管，蜡笔，消毒棉球，瑞氏染液，pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液，姬姆萨染液，蒸馏水。
实验步骤
1. 血涂片的制作：取一滴血（采血方法见实验49），滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端（图一）。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。
2. 血涂片的染色步骤：
（1）用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于水平的支架上。
（2）用小滴管将瑞氏染液滴于涂片上，并盖满划出的涂片部分固定约半分钟。
（3）用小滴管再加1.5倍缓冲液或姬姆萨（Glemsa）染液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置5~10分钟。
（4）用蒸馏水冲洗（如自来水的pH值稳定于7.2左右时亦可代用）。冲洗血膜时应将玻璃片持平，冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。
3. 白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处（一般在体尾交界处），在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。
例如：嗜中性白细胞分数（%）=计数嗜中性白细胞个数/计数白细胞个数×。
图一、血涂片制备示意图
红细胞呈桔红色；中性粒细胞核为蓝紫色，颗粒呈蓝紫至紫红色；嗜酸性粒细胞颗粒呈鲜红至桔红色；嗜碱性粒细胞颗粒呈深蓝紫色；淋巴细胞核呈深蓝紫色，胞质呈天蓝色；单核细胞核呈浅紫色，胞质呈灰蓝色。
方法评估
显微镜法白细胞分类是经典、传统的血细胞分类法，目前还无任何仪器可以完全取代。它能够准确地根据细胞形态特征进行分类计数，并可及时发现异常细胞。血液分析仪进行细胞分类主要是从细胞的体积大小、细胞核形、细胞化学染色等方面进行检测，检测速度快，分析细胞多，适宜于大批量标本的分析。对其检测出来的异常标本，要准确识别细胞类别及确认病理改变还必须以显微镜检查为准。
应用意义
在不同的生理状态下，不同种类白细胞数目波动较大。如运动、寒冷、消化期、繁殖期等，此外，在机体失血、剧痛、急性炎症、慢性炎症等病理状态下，白细胞也增多。例如，急性感染、急性中毒、严重组织损伤、恶性肿瘤等中性粒细胞增多；某些病毒、细菌感染、某些慢性感染时，淋巴细胞数量增多。
注意事项
1. 所用玻片必须干净，无油污。
2. 如染色太浅，可按照原来步骤重染；染色太深或有沉淀物则可用甲醇脱色后重染。
3. 如白细胞核为天蓝色则染色时间过短。如红细胞呈紫红色，表示染色时间过长。
4. 染色时切勿使染液干涸，否则发生不易去掉的沉淀。
5. 冲洗时不可先倾倒染色，应先轻轻摇动玻片，缓慢加水使沉渣泛起，然后再用水冲洗。
6. 水冲洗时间不宜过长，否则会脱色。
