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引言
T7 Scribe™标准RNA IVT试剂盒经过特殊设计,使用户能够获得***的
体外转录(IVT)反应可能产生标准(GAUC)RNA。标准2小时,20μl反应将从1μg对照模板中产生高达150μg的RNA。这些收益率是由于T7划线酶的高性能而成为可能。
T7文案标准RNA试管技术试剂盒产生极高的产量,无论是长或短转录。
标准反应可以放大,产生毫克的RNA。此外,T7划线器反应可以很容易地修改,以制备荧光、生物素化或***标记的RNA。
T7-scribe-ivt-rna可以通过使用CellScript的Scriptcap™M7g封端系统,
A-PLUS™聚(A)聚合酶尾试剂盒(单独提供)。
Cell
人类和其他哺乳动物细胞表达不同的RNA传感器未修改的mrnas.

| T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit Contents (50 reactions) | |
| Kit Component | Reagent Volume |
| T7-Scribe™ Enzyme Solution | 100 μl |
|
10X T7-Scribe™ Tran |
100 μl |
| 100 mM GTP | 75 μl |
| 100 mM ATP | 75 μl |
| 100 mM UTP | 75 μl |
| 100 mM CTP | 75 μl |
| 100 mM Dithiothreitol (DTT) | 100 μl |
| RNase-Free DNase I, 1 U/μl | 50 μl |
| ScriptGuard™ RNase Inhibitor, 40 U/μl | 25 μl |
| T7 Control Template DNA, 0.5 μg/μl | 10 μl |
| RNase-Free Water | 1.4 ml |
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存储缓冲区
无RNase的dnase i以50%甘油溶液提供,其中含有50 mM Tris HCl,pH7.5,
10 mm CaCl2、10 mm MgCl2和0.1%Triton®X-100。ScriptGuard RNase抑制剂在
50%甘油溶液,含50 mM Tris-HCl,pH7.5,100 mM NaCl,10 mM DTT,0.1 mM EDTA
以及0.1%Triton X-100。所有其他酶都在含有50 mM的50%甘油溶液中提供。
Tris-HCl,pH 7.5,100 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA和0.1%Triton X-100。
单位定义
一个无RNase dnase i单位在10分钟内将1μg puc19 dna消化为寡脱氧核苷酸。
在37点钟C.一个单位的
用核糖核酸酶A抑制环2’,3’-CMP水解测定。
功能测试
在标准反应条件下,使用
T7控制模板DNA。试剂盒必须从1μg的T7中产生至少136μg的RNA。
37o下2小时内控制模板DNAC.污染活性分析
T7文案标准RNA IVT试剂盒的所有成分均无可检测的RNase和dnase。
活性,除了无RNase dnase i组分的固有活性。