通用型葡萄扇叶病毒基因检测试剂盒-上海一基实业有限公司测定意义:单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有的化学性质和多种生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。测定原理:单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在760nm处有总线大吸收峰。需自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
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测定意义:花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素,属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中,使其呈现由红到紫等不同颜色,是植物主要的呈色物质。测定原理:采用pH示差法测定花色苷含量,当pH为1.0时花色苷在530nm处有总线大吸收峰,而当pH为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在530处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同pH下的530nm和700nm处的吸光度值。pH示差法减少了溶液pH和溶剂差异的影响,排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。需自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
测定意义:GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此,GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外,因为GST具有GSH-Px活性,亦称为non-Se GSH-Px,具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。注意,GST催化的反应减少GSH含量,但是不增加GSSG含量。测定原理:GST催化GSH与CDNB结合,其结合产物的光吸收峰波长为340nm;通过测定340nm波长处吸光度上升速率,即可计算出GST活性。实验中所需仪器及设备:紫外-可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml石英比色皿、双蒸水。
·测定意义: PPO(EC1.10.3.1)主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。测定原理:PPO能够催化邻苯二酚产生醌,后者在525nm有特征光吸收。需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
测定意义:TPX属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与GPX类似,也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶。TPX普遍存在于各种生物体内,酵母、植物、动物、原生动物、寄生甚至细菌和古细菌体内都含有该酶,在进化上高度保守。TPX与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。TPX的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。测定原理:TPX催化H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2的吸收波长为240nm,通过测定240nm波长处吸光度的下降速率,即可计算出TPX活性。实验中所需仪器及设备:紫外-可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、3ml石英比色皿、双蒸水
测定意义:漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。测定原理:漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、震荡仪。