人慢性骨髓性白血病细胞的培养及注意事项！
一、细胞简介
平台编号：bio-73071
规格：1×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名：K-562
细胞名称：K-562（人慢性髓原白血病细胞）
种属：人
年龄（性别）：女；53岁
组织来源：骨髓；慢性骨髓性白血病(CML)
生长特性：悬浮
细胞形态：淋巴细胞样
细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
传代方法：首次建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件：90%FBS+10%DMSO
背景描述：连续细胞株K-562是由Lozzio从一位临终的53岁女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。K-562细胞被归入高度未分化的粒性白细胞类，Erson等对其表面膜性质的研究表明，K-562细胞是一株人类红白血病细胞。K-562细胞在自然杀伤分析中广泛作为高敏感的体外受体，See Pross等将K-562细胞用于NK细胞的体外详细检测，包括NK细胞活性的数学量化。K-562母细胞是多能性造血恶性细胞，它能自发分化成可识别的红血球祖细胞、粒性白细胞、单核细胞等。K-562细胞是EBNA阴性的。
生长培养基： IMDM(货号:PM150510)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件： 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
说明书下载：K-562 [K562].pdf
二、细胞常规培养传代流程
1、吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；
2、镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；
4、注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存。
三、特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间*长不宜过７２小时)；
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；
3、如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
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