产志贺毒素大肠埃希氏菌菌种说明!

发布时间:2020-05-18

                             产志贺毒素大肠埃希氏菌菌种说明!


                              产志贺毒素大肠埃希氏菌菌种说明!

一、菌种简介

平台编号:bio-56946

拉丁属名:Escherichia coli STEC

提供形式:冻干物

中文名称:产志贺毒素大肠埃希氏菌

拉丁名称:Escherichia coli STEC

其它保藏中心编号:#NAME?

来源历史:←上海市疾病预防控制中心

收藏时间:2013/4/15

原始编号:EHEC5-92

模式菌株:非模式菌株

主要用途:研究

特征特性:革兰氏阴性杆菌,在麦康凯培养基上生长成红色菌落,菌落圆而突起,能发酵乳糖。

生物危害程度:三类

培养基编号:CM0002

培养基名称:营养肉汁琼脂

培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。

培养温度:37℃

需氧类型:好氧

分离基物:腹泻病例粪便标本

基因元器件:含紧密黏附素基因(eaeA)、志贺毒素基因(stx1、stx2)和毒力基因ehxA,不含estA、eltA、ipaH基因。

保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法

共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享


二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。


三、培养条件

1、培养基编号:CM0002

2、培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入 5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。

3、需氧类型:好氧

4、培养温度:37℃


四、注意事项

1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。


五、冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。

2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于条件下静置培养。以液体培养结果为准。

3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要转接至 2-3 代恢复活力。

4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。

5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。

6、冻干管打开后需一次用完,不能留存。

7、打管操作需由*微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。


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