HS-746T人胃癌细胞的应用！
一、背景
HS-746T细胞是一种三倍体人类胃癌细胞系，HS-746T细胞大小，形状及核状态均会在培养过程中发生变化。由于细胞的恶性化，染色多为亚三倍体（46%）。人胃癌细胞来源于人体胃组织正常细胞的恶变。
人的正常胃组织含有多种细胞成分，包括腺细胞，鳞状细胞，平滑肌细胞，间叶细胞等。这些细胞在一定因素影响下，发生基因突变，产生了恶变细胞，这些恶变细胞进行增殖，就形成胃癌。胃癌的癌细胞形态多样，组织学行为各异，根据其细胞分化程度，分为高分化、低分化、未分化等类型，高分化癌预后相对较好，未分化癌细胞相对预后较差。胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。
由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因，使得胃癌呈现年轻化倾向。胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。胃癌的预后与胃癌的病理分期、部位、组织类型、生物学行为以及治疗措施有关。
二、应用
用于葫芦素D抑制胃癌细胞存活的作用及其机制研究：
葫芦素（Cucurbitacin）是一组从葫芦科和十字花科植物中提取的天然三萜系化合物。现代研究报道葫芦素在多种肿瘤疾病中均发挥抗炎、抗肿瘤的作用,可抑制多种肿瘤细胞系的细胞生长并促进其凋亡。其中葫芦素B、D、E、I、F、O、P和Q均可通过抑制STAT3磷酸化而抑制肿瘤细胞的增殖与分化。
研究了多浓度梯度、时间梯度下,葫芦素D对胃癌AGS、SNU1、HS76T细胞增殖和凋亡的影响;应用SC79激活Akt的表达,左旋刀豆氨酸（L-canavanine）抑制iNOS的表达,并探讨葫芦素D发挥抗胃癌作用的潜在机制;在组织水平,本课题构建了裸鼠移植瘤模型,在体研究葫芦素D对胃癌增殖和凋亡的影响,旨在探讨葫芦素D对胃癌的在体作用及其分子机制。
方法：应用CCK-8法检测不同浓度梯度及时间梯度下,Cucurbitacin D对胃癌AGS、SUN1、Hs746T细胞体外增殖的影响;选用DCFH-DA荧光探针检测不同浓度Cucurbitacin D对胃癌AGS、SUN1、Hs746T细胞内ROS水平的影响;应用TUNEL染色法探讨Cucurbitacin D对胃癌AGS、SUN1、Hs746T细胞凋亡的影响;还检测了不同浓度梯度及时间梯度下,Cucurbitacin D对胃癌AGS、SUN1、Hs746T细胞内Ca2+及NO含量的影响。
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