鸡免疫球蛋白A(IgA)elisa试剂盒产品介绍
鸡免疫球蛋白A(IgA)elisa试剂盒上海帛科生物技术有限公司鸡免疫球蛋白A(IgA)elisa试剂盒,ELISA试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断在ELISA中,包被于固相载体表面的抗原或抗体的来源和制备方法对试验结果都有影响。包被所用的抗原必须是可溶性的,而且要求是和稳定的制剂,纯度和免疫原性要高。如果不纯,由于抗原中所含杂质就会竞争固相载体上的有限位置,降低敏感性和特异性。此外还应考虑到制备包被抗原不应破坏其免疫学活性。
在ELISA中,包被于固相载体表面的抗原或抗体的来源和制备方法对试验结果都有影响。包被所用的抗原必须是可溶性的,而且要求是和稳定的制剂,纯度和免疫原性要高。如果不纯,由于抗原中所含杂质就会竞争固相载体上的有限位置,降低敏感性和特异性。此外还应考虑到制备包被抗原不应破坏其免疫学活性。
中文名称:elisa检测试剂盒
名称:上海帛科
产品规格:96T/48T
运输方式:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
产品价格:价格优惠,欢迎在线留言洽谈!
使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(INS)水平。用纯化的小鼠胰岛素(INS)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠胰岛素(INS),
再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(INS)含量。
组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶标试剂 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×浓缩洗涤液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注:标准品浓度依次为:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间总线好控制在5分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线,总线好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以稀释倍数(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物请避光保存。
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
本试剂不同批号组分不得混用。
如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
1、使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。
2、操作时应尽量少说话,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性;整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。
3、实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。
4、反应管中加好所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免形成过多的二聚体。
5、细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;
或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
上海帛科生物技术有限公司shanghaishengwu是一家经营生化试剂、仪器、实验室耗材的公司, 代理许多国际水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美生产厂家的具有国际水平的产品给各类研究人员;另一方面也非常重视产品研究和开发,推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时对于生物行业的发展给予了极大的重视,更多地侧重于科研的投入。 公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司的服务和业务 在同行获得一致好评。其立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,也具备丰富的管理经验,同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。
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