液相色谱仪检测器日常的维护和故障排除

分析常见问题

            可能的原因：

       流通池脏

       检测器灯有问题

       如果是周期性的，电压或泵的脉冲

       温度对检测器的影响

       气泡经过检测器

基线噪音

基线漂移

               可能的原因：

          梯度洗脱

          温度不稳定 (示差检测器）

          流动相中有污染物

          柱中的流动相没有平衡

             体系中有污染物流出

          流通池的渗漏

液相色谱仪检测器的日常维护

故障：样品池受污

表现：样品池和参比池能量相差较大

检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看能量的参比值和透过值，如两者相差较大，则样品池受污。

措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。

储液罐

g 使用HPLC试剂/溶剂

g 含缓冲盐的流动相过0.25μm膜除去微粒物质

g 更换流动相时,应清洗，防止交叉污染。

g 定期清洁储液器及附件，防止长微生物

检测器（流通池）

   保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗

   不定期用强溶剂反向冲洗检测器

   使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内

   检测器灯有一定寿命，平衡和清洗色谱柱时不要开灯。

流通池的清洗方法（尽量少用）

断开所有的管路，把针泵接到流动池的出口

g用10--20ml纯水冲洗流动池（要确认所用溶剂已洗干净）

g用10--20ml的20%硝酸冲洗流动池（可以适当停留30min左右）

g用30—40ml左右纯水冲洗

g用10—20ml左右甲醇冲洗

g用干净的气体吹干

常见故障及解决方法

灯故障:基线噪声大,灵敏度低。

 ? 氘灯寿命:1000h

 ? 汞灯和钨灯寿命:2000h

    一般使用6个月以上可能接近寿命期限,可以考虑更换新灯

流动池

 ? 流动池内有气泡：用脱气甲醇，不同流量冲洗

 ? 池堵塞（入口、出口、池内）：用可溶堵塞物的溶剂冲洗 （缓冲盐用水冲洗）

 ? 池污染：异丙醇、二氯甲烷、 6mol/L HNO3 冲洗

测量池和参比池失配：UV以空气为参比，一般不扣流动相本底。若用有紫外吸收的流动相，参比信号不为零，会出现倒峰和伪峰。此时，选择合适的流动相。

    时间常数选择（过滤噪声）：有的仪器有固定的时间常数，有的需设置时间常数。时间常数太小, 噪声增大;时间常数太大,出现宽峰、拖尾或矮峰。时间常数的设置一般根据经验估计，小颗粒柱常数小，可选窄峰宽的1/10作为时间常数,对4.6×(150-250)mm，5um柱，可选0.5s or1s

出线性范围：

   样品量太大

 ?检测器的衰减出了其线性动力学范围

 ?流动相的紫外吸收比较强

   环境温度变化引起基线漂移  

g 流动相温度变化引起折射率改变，紫外光传导变化  

g 柱温变化引起基线漂移

记录仪和数据处理系统信号线插接不紧,接触不良，信号很弱，出现不需要的噪音,此时按说明书检查线路连接。

g地线对仪器很重要, 仪器外壳和信号线的接地很严格，接地不良会出现较大的基线噪声，接错线会造成短路，烧毁仪器。

次级发射效应：用氘灯作可见光范围的光源时会发生次级发射效应，用钨灯没有此影响.

g正确选择波长:既照顾到灵敏度,有考虑到稳定性

g波长校准：机械转动光栅选择波长,因磨损造成所选波长与刻度盘上的不一致，而且重复性也差。可用波长溶液校准：235、257、315、350nm 。