实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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p90RSK Ab-348 Antibody |
详见说明 |
FS-S964344 |
友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
大耳山羊肺细胞;LDG-12-甲基环戊[I]菲(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Naphtho[2,3-a]pyrene
CL-0055Caov-3(人乳突状卵巢腺癌细胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2-Chlorophenothiazine
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
小鼠肠上皮细胞完全培养基 100mL异丁司特质量规格:>98%Ibudilast
A2(人腺样囊性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠色素瘤细胞;B1696孔不可拆酶标板1毫克 保存:-20℃
人脐静脉平滑肌细胞RNAHUVSMC miRNA5 μg三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
大鼠海马趾星形胶质细胞(RAh)(5×105)液体生物防腐剂1克
恒河猴肾细胞;LLC-MK2N-甲基吩嗪甲基盐25克
KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠肾上皮细胞完全培养基 100mL609-71-22-羟基烟酸2-xy7noxynicotinic
acid
人脑瘤细胞;SF767替卡西林钠25克
Saos-2细胞,成骨肉瘤细胞 人鼻咽癌细胞,HNE1细胞 CL-0273ECV-304(人脐静脉内皮细胞)5×106cells/瓶×23-基-1,2-丙二酮 (±)-3-Amino-1,2-propanediol,97% 616-30-8 5G 通用试剂
仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4BL-高精安醋言醋盐 L-HoMocrgininq xy7nochloridq;(S)-2-cMi-no-6-gucnidinohq-xcnoic ccid xy7nochloridq1483-01-8
TFPI2 Others Human 人 TFPI2 人细胞裂解液 (阳性对照) 毛地黄皂苷5克RT
表皮角化细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)9001-42-7α-葡糖苷酶(+4℃)EC3.2.1.20
72629-76-6ProsapogeninCP6说明书 Prosapogenin CP6 组分氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光量检测试剂盒50
72581-71-6异水飞蓟宾 Isosilybin 组分氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光量检测试剂盒50
72520-92-4丹皮酚原苷说明书 1-[4-methoxy-2-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-[[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-phenyl]ethanone 组分氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光量检测试剂盒50
7212-44-4橙花叔醇说明书 Nerolidol 组蛋白转甲基酶活性检测试剂盒(H3-K9)20
72063-39-9斯皮诺素 Spinosin 组蛋白转甲基酶活性检测试剂盒(H3-K4)20
p90RSK Ab-348 Antibody注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。