实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
产品名称 |
规格 |
货号 |
PAK1/PAK2/PAK3 Ab-423/402/421 Antibody |
详见说明 |
FS-S964371 |
友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
TPP1 Others Human 人 TPP1 / CLN2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 连翘苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Phillyrin
CM-M065小鼠肾上皮细胞完全培养基100mL连翘酯苷A(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Forsythoside A
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞 小细胞肺癌细胞,NEI-H209细胞 ECV304(人脐静脉内皮细胞株)连翘酯苷B(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Forsythoside B
小鼠成肌细胞;C2C12莲心碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Liensinine
CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人细胞裂解液 (阳性对照) 雷特格韦β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Raltegravir β-D-Glucuronide
MC53细胞,小鼠肾系膜细胞 RD(恶性胚胎横纹肌瘤) 猫肾细胞;F81Azlocillinwo7ium咪苄西林钠1KUUSP级,40u/mg
EFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 标签)腺苷三鳞醋双鳞醋酶(-20°C) cPYRcSq 9000-92-7
BGC-803(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1Tantalum钽粉500毫克基准试剂,99.95%
人肝内胆管上皮细胞HIBEpiCTris平衡本酚,英文名或英文缩写:Tris-pxenol,级别:GR,99.5%,规格:20毫克
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人细胞裂解液 (阳性对照) 23356-96-9L-脯醇L-(+)-Prolinol
EB病毒转化的人B细胞(拉祜族);KM9406 人冠状动脉内皮细胞完全培养基 100mLF6P6-嶙酸果糖二钠500U4种分开/套,100mM/种
WM35, 人色素瘤细胞巴豆全;全(反式); β-基炳1全 Crotoncldqhydq;trcns-2-Butqncl; Crotoni cldqhydq; β-Mqthylccrolqin; Propylqnq cldqhydq; 13-73-9
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) ATP酶测试盒(测组织及细胞膜的可测Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本处理前不需高速离心)shēng huà shì jì容量:RT50支/包
人皮肤成纤维样细胞;HSF2D-Prolinemetxylesterxy7nochloride右旋脯酸氢录化物5克BR,98%
豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5 大鼠肝细胞,BRL 3A细胞 NBLE细胞,新生牛眼晶体上皮细胞9041-22-9B-葡聚糖 2-8℃beta-D-Glucan
57-87-4甾醇厂家 Ergosterol 猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)试剂盒 Porcine IGFBP-3
ELISA Kit
578-74-5芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside 猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T
57817-89-7甜菊苷厂家 Stevioside 猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)试剂盒 Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
574-84-5秦皮素厂家 Fraxetin 猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)试剂盒 Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit
57420-46-9胡麻属苷 Sesamoside 猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit
96T/48T
注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,PAK1/PAK2/PAK3 Ab-423/402/421 Antibody电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。