血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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p70 S6 Kinase Ab-424 Antibody |
详见说明 |
FS-S964465 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人细胞裂解液 (阳性对照)
Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特,98.5%
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11,4-二肖基本;队二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4
NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人细胞裂解液 (阳性对照) 水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-
原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1mlDodecane正十二烷20毫克AR,98%
ECV-304细胞,人脐静脉内皮(具有T24细胞特性) 金黄色葡萄球菌 人牙龈成纤维细胞RNAHGF
NA13007-92-6六羰基ChroMiuM hexacarbonyl
EB (NBL-4)细胞,牛胚气管细胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人脑星型胶质瘤细胞) CM-H018人成纤维细胞完全培养基100mL镉黄,英文名或英文缩写:Cadmium sulfide,级别:AR,99.5%,规格:10克
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鳞钼醋铵 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3
MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)苄氧羰基甘酸,英文名或英文缩写:CBZ-L-Gly,级别:特,99%,规格:100克
前列腺上皮细胞培养基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT无RNA胶试剂盒RTsigma
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
GDNF Others Human 人 GDNF 人细胞裂解液 (阳性对照)
SEQUENCINGGELLOADINGDYE,3X3X核酸电泳上样缓冲液,测序用级暗紫色微粘稠液体COLDsigma
大鼠神经胶质细胞完全培养基 100mL溴化镉 CcdMiuM broMidq7789/4/6
MKN-45人胃癌细胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBSD-(+)-基葡萄糖盐... D-(+)-Glucosamine (≥99%) 66-84-2 25G 通用试剂
IFNG Protein Mousep70 S6 Kinase Ab-424 Antibody 重组小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 标签)N-苄氧羰基-D-本,英文名或英文缩写:Z-D-pxenylalaninol,级别:BR,98%,规格:10克
NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV转化的3T3细胞)(L-抗坏血酸,维生素C)
219944-46-4七叶皂苷D AescinIIB 英文名称RatProlactinELISAKit大鼠促乳素(Prolactin)规格:96T/48T
21967-41-9黄芩苷 Baicalin 英文名称RatProinsulinELISAKit大鼠胰岛素原(PI)规格:96T/48T
21967-41-9黄芩苷 Baicalin 英文名称RatProinsulinELISAKit大鼠胰岛素原(PI)规格:96T/48T
2188-68-3盐酸石蒜碱规格 Lycorine chloride 英文名称RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit规格:96T/48T
2182-14-1文多灵 Vindoline 英文名称RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit规格:96T/48T
友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!