血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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synaptophysin 2 Antibody |
详见说明 |
FS-S964545 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
MMP1 Others Human 人 MMP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸(分析标准品,≥99.5%(GC))质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)Stearic
acid
CM-R044大鼠结肠平滑肌细胞完全培养基100mL甜蜜素(标准品)质量规格:分析标准品 Cyclamate
SELP Others Human 人 SELP / selectin P / P-selectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 绿麦隆标准溶液(100μg/ml,u=4%)质量规格:100μg/ml,u=4%Chlortoluron solution
小鼠胎儿成纤维细胞完全培养基 100mL敌草隆(99%)质量规格:0.99Diuron
EL4小鼠瘤细胞 EL4 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS四螨嗪(分析标准品,98.6%)质量规格:分析标准品,98.6%Clofentezine
兔主动脉平滑肌细胞;SMC4-羟基丙泊酚质量规格:美国进口4-Hydroxy
Propofol
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2-二甲基-4-异丙基-1,3-苯并二茂质量规格:美国进口2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole
J82 人膀胱移行细胞癌4-羟基丙泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide
NCI-H716 [H716]人结直肠腺癌细胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-羟基丙泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide
VEGFA Protein Human 重组人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA /
VEGF165 蛋白别隐品碱;A-别隐品碱(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品Allocryptopine
RWPE1(人前列腺上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 人 SMR3B 人细胞裂解液 (阳性对照) AGAROSELF大片段琼脂糖(脉冲电泳)(原Agarose Ⅲ)脉冲电泳级25G9012-36-6RT
EB病毒转化的人B细胞;KMY09032-丁同1;丁同1;同1 2-Butcnonq oxiMq;Butcnonq oxiMq;ButcnoxiMq;qthyl Mqthyl kqtoxiMq 1996/9/7
EDEM2 Others Human 人 EDEM2 / C20orf31 人细胞裂解液 (阳性对照) D-环丝酸5克RT
CL-0401NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2单道移液器P105克
MDBK细胞,牛肾细胞 人慢性髓原白血病细胞,K562细胞 人胚胎,皮肤,肌肉;M-2259-52-92,3-二,95%2,3-Dimercapto-1-propanol
rabbitthyroxine,T4ELISAKit兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 14937-32-71,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose
synaptophysin 2 Antibody载玻片细胞CDK6蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 1241-87-81-咖啡酰奎宁酸规格 1-caffeoylquinic acid
Humanβai-galactanproteinsIgGELISA试剂盒人β乳糖蛋白抗体IgGELISA试剂盒规格:96T/48T 1182-34-91,3-二咖啡酰奎宁酸厂家 Cynarin
小鼠组织蛋白去乙酰化酶2(Hdac2/Yy1bp)ELISA试剂盒 ,英文名: Hdac2/Yy1bp ELISA Kit 30964-13-71,5-二咖啡酰奎宁酸说明书 1,5-Dicaffeoylquinic acid
小鼠凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Mousethrombieceptor,ELISAKit
96T/48T 86632-03-33,4,5-三咖啡酰奎宁酸 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid
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