鸭呼肠孤病毒PCR快速诊断试剂盒 LAMP-PCR法

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
  PCR反应的特异性决定因素为：
  ①引物与模板DNA特异正确的结合；
  ②碱基配对原则；
  ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。

产品名称：鸭呼肠孤病毒PCR快速诊断试剂盒 LAMP-PCR法
产品分类：鸭呼肠孤病毒PCR快速诊断试剂盒 LAMP-PCR法
规格：50T

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。

E ELISA Kit 大鼠雌激素 96T
Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人钩端螺旋体IgG 96T
Human Amebiasis ELISA Kit 人阿米巴 96T
VCAM-1/CD106 ELISA kit 大鼠血管内皮细胞粘附分子 96T
IL-8/CXCL8 ELISA Kit 大鼠白介素8 96T
Human Diphtheria antibody ELISA Kit 人白喉抗体 96T
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊虫病抗体 96T
ADP ELISA Kit 大鼠脂联素 96T
Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 人布鲁氏菌抗体IgG 96T
f- BetaCG ELISA Kit 大鼠游离β绒毛膜促性腺激素 96T
VZV-IgM(Human Varicella zoster virus IgM ELISA Kit 人水痘带状疱疹病毒IgM 96T
ALD ELISA Kit 大鼠醛固酮 96T
NA ELISA Kit 大鼠去甲肾上腺素 96T
VZV-IgG(Human Varicella zoster virus IgG) ELISA Kit 人25羟基维生素D3 96T
LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4 96T
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人肠脂肪酸结合蛋白 96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1 96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂联素 96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人组胺 96T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
鸭呼肠孤病毒PCR快速诊断试剂盒 LAMP-PCR法ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特异性碱性磷酸酶B 96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨钙素/骨谷氨酸蛋白 96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受体活化因子配基 96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羟基维生素D3 96T
Human histon-H2b ELISA Kit 人组蛋白H2b 96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保护素 96T