操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
产品名称:植物硝态氮
检测方法:微量法
规格:0.2g或者0.2mL
遮蔽蛋白检测试剂盒 Obscurin试剂盒
张力蛋白3酶联免疫试剂盒 Tensin 3试剂盒
张力蛋白2ELISA试剂盒 Tensin 2试剂盒
张力蛋白1进口试剂盒 Tensin 1试剂盒
粘脂蛋白3试剂盒 Mucolipin 3试剂盒
粘脂蛋白2定量试剂盒 Mucolipin 2试剂盒
粘脂蛋白1测定试剂盒 Mucolipin 1试剂盒
粘着斑激酶试剂盒elisa Focal Adhesion Kinase试剂盒
粘膜关联上皮趋化因子elisa方法 Mucosae Associated Epithelia Chemokine试剂盒
粘蛋白7检测试剂盒 Secreted试剂盒
粘蛋白6酶联免疫试剂盒 Mucin 6试剂盒
粘蛋白5BELISA试剂盒 Mucin 5 Subtype B试剂盒
粘蛋白5AC进口试剂盒 Mucin 5 Subtype AC试剂盒
粘蛋白4试剂盒 Mucin 4试剂盒
粘蛋白21定量试剂盒 Mucin 21试剂盒
粘蛋白20测定试剂盒 Mucin 20试剂盒
粘蛋白17试剂盒elisa Mucin 17试剂盒
粘蛋白13elisa方法 Cell Surface Associated试剂盒
粘蛋白12检测试剂盒 Cell Surface Associated试剂盒
粘蛋白1酶联免疫试剂盒 Mucin 1试剂盒
增殖关联蛋白2G4ELISA试剂盒 Proliferation Associated Protein 2G4试剂盒
造血蛋白1进口试剂盒 Hematopoietic Protein 1试剂盒
造血蛋白试剂盒 Hemogen试剂盒
造骨细胞钙黏蛋白定量试剂盒 Osteoblast试剂盒
皂素测定试剂盒 Haponin试剂盒
早幼粒细胞白血病蛋白试剂盒elisa Promyelocytic Leukemia Protein试剂盒
早期生长应答因子4elisa方法 Early Growth Response Protein 4试剂盒
早期生长应答因子3检测试剂盒 Early Growth Response Protein 3试剂盒
早期生长应答因子2酶联免疫试剂盒 Early Growth Response Protein 2试剂盒
早期生长应答因子1ELISA试剂盒 Early Growth Response Protein 1试剂盒
早期内体抗原1进口试剂盒 Early Endosome Antigen 1试剂盒
早期B-细胞因子2试剂盒 Early B-Cell Factor 2试剂盒
植物硝态氮早期B-细胞因子1定量试剂盒 Early B-Cell Factor 1试剂盒
早老素2测定试剂盒 Presenilin 2试剂盒