实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
产品名称:DH10Bac大肠杆菌
拉丁文: Escherichia
coli DH10Bac
提供形式: 西林瓶,菌片
安全等级: 1
模式菌株: 未知
应用领域: 用于基因克隆(抗性:Kan/Tet)
培养基: LB
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。
生长条件: 37℃,有氧,LB
存储条件: -20℃避光保存;运输条件:常温运输。
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产品名称 |
DH10Bac大肠杆菌 |
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英文名称 |
Escherichia coli DH10Bac |
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货号 |
FS-J63664 |
公司代理ATCC菌种, 质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种培养:产品仅用于科研
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
支气管上皮细胞培养基BEpiCM洛沙坦钾/氯沙坦钾质量规格:HPLC>98%,标准品Losartan Potassium
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4 胃腺癌细胞,SGC7901细胞 CW-2(结肠腺癌细胞)马赛替尼质量规格:>98%Masitinib
EB病毒转化的B细胞;KMY0911碱式碳酸铜(铜度:52.5~56.5%)质量规格:度(铜):52.5~56.5%Copper(II) carbonate basic
CTSA Others Mouse 小鼠 CTSA / Cathepsin-A 细胞裂解液 (阳性对照) 氧化铜粉(>99%,BR)质量规格:>99%,BRCopper(II) oxide
CM-M032小鼠肠静脉内皮细胞完全培养基100mL焦1铜质量规格:(Cu):36.0~38.0%,Tech GradeCopper(II)
pyrophosphate
紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 支/瓶 人*淋巴上皮细胞完全培养基 100mL
AMY2A Others Human AMY2A / Alpha-amylase 细胞裂解液 (阳性对照) 胆戊基碳酸酯Cholesterol Amyl Carbonate质量规格:
肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL胆正辛基碳酸酯Cholesterol n-Octyl Carbonate质量规格:
NFS-60细胞,小鼠白血病细胞G-CSF依赖性 HeLa [ Chang Liver ](张氏肝细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1胆己基碳酸酯Cholesterol Hexyl Carbonate质量规格:
XCL2 Protein Human 重组 XCL2 蛋白 (His 标签)4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate质量规格:>95.0%(HPLC)
PK-15(猪肾细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells
ansfected Lysate (positive corol) (denatured)碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))Butyl 4-Carboxyphenyl
Carbonate质量规格:>98.0%(T)
阿舒多囊霉 粪肠球菌
解藻弧菌(溶藻弧菌) 昆明链霉菌
刺孢小单孢菌绛红变种 中山乳芽胞杆菌中山亚种 Sporolactobacillus nakayamae
日本根霉 土乳芽胞杆菌 Sporolactobacillus terrae
黄色短杆菌 大丽轮枝菌 Verticillium dahliea
DH10Bac大肠杆菌保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于*适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*广的微生物保存法。