实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
产品名称:萎缩芽孢杆菌
拉丁文: Bacillus
atrophaeus
提供形式: 冻干管,斜面培养物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 灭菌指示菌。
培养基: 蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
传代方法: ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。
②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧
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产品名称 |
萎缩芽孢杆菌 |
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英文名称 |
Bacillus atrophaeus |
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货号 |
FS-J63733 |
公司代理ATCC菌种, 质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种培养:产品仅用于科研
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
GDF15 Protein Human 重组 GDF-15 蛋白 (Fc 标签)盐酸特拉唑嗪(标准品)质量规格:含量测定Terazosin HCl
肝窦内皮细胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Rattus氯化钠(标准品)质量规格:含量测定 chloride
小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]氨力农(标准品)质量规格:UV法含量测定Amrinone
SERPINB3 Others Human SerpinB3 / SCCA-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 更昔洛韦(标准品)质量规格:含量测定Ganciclovir
CM-R102大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基100mL反式玉米素葡萄糖苷质量规格:美国进口trans-Zeatin glucoside
亚利桑那菌琼脂(SA)于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)
HFDPC-c 人类的毛细胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACIIB / ACVR2B 细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸环丙孕酮(标准品)质量规格:含量测定Cyproterone acetate
大额牛肾细胞;BFR-K1甲地孕酮质量规格:>98.5%,BRMegestrol
肾系膜细胞 (HRMC)(1×106 )烟酸乙酯(>98%,BR)质量规格:>98%,BREthyl nicotinate
CL-0179P19(小鼠畸胎瘤细胞)5×106cells/瓶×2二茂铁质量规格:>98%Ferrocene
结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T] 大鼠雪旺氏细胞完全培养基 100mL反苯环丙胺盐酸盐;单胺氧化酶(MAO)抑制剂质量规格:>97%,单胺氧化酶(MAO)抑制剂Tranylcypromine (2-PCPA) HCl
山梨醇发酵管5ml 30 支/盒
嗜热脂肪芽孢杆菌冻干粉
芽孢杆菌 大肠杆菌
胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基(四)60mm表面活性剂的各种复方消毒剂消毒过的物表 苏云金芽胞杆菌以色列亚种 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis
娄地青霉 鲁氏毛霉
热带灵芝 侧耳
萎缩芽孢杆菌保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于*适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*广的微生物保存法。