葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6-PD测试盒测红细胞

发布时间:2021-08-11
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,研发,*技术研发团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6-PD测试盒测红细胞
检测方法:盒
规格:100管/30样

样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品:
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、纯水。
β-淀粉酶

 通用规则:

1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

tetraMethyl- phenyltriaMinodiphenyl-α-naphthylcarbinolanhydride;C.I. 44045
乙烯基三乙氧基硅烷;三乙氧基乙烯基硅烷;(三乙氧基甲硅烷基)乙烯 78-08-0 Vinyltriethoxysilane;(Triethoxysilyl)ethylene
维生素B12;维生素乙12;氰钴胺;维他命B12 68-19-9 VitaMin B12;Cyanocob(III)alaMin;α-(5,6-DiMethylbenziMidazolyl)cyanocobaMide
伍德合金;铋铅锡镉合金;伍氏金;武德金 76093-98-6 Wood's Metal;Wood's Metal fusible
瑞氏色素;曙红亚甲基蓝I;瑞氏染色素;赖氏色素;曙红变性次甲蓝 68988-92-1 Wright's stain
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6-PD测试盒测红细胞木聚糖;半木质;半纤维;木糖胶;多缩木糖;木胶 9014-63-5 Xylan;HeMicellulose;HeMicellulose A
酸性蓝 116-95-0 ACID BLUE 1
二甲苯蓝FF;二甲苯花黄FF 4463-44-9 Xylenecyanol FF ;Xylene cyanol;SodiuM salt of M′-hydroxydiethyldi-  aMinophenyl ditolylcarbinol disulfonic acid;C.I. 43535
二甲酚橙;二甲酚桔黄;3,3′-双[N,N-二(羧甲基)氨基甲基]邻甲酚磺酰酞;邻甲酚磺酰酞-3,3′-双甲基亚氨基二乙酸;二甲酚橙三钠盐 1611-35-4 Xylenol orange;3,3′-Bis[N,N-di(carboxyMethyl)aMinoMethyl]-o-cresolsulfonphthalein;o-Cresolsulfonphth-alein-3,3′-bisMethyliMinodiacetic acid
木糖醇 87-99-0 Xylitol;Eutrit;Kannit;Klinit;Kylit;Newtol;Torch;Xyliton
盐酸育亨宾 65-19-0 YohiMbine Hydrochloride
溴化锌;无水溴化锌 7699-45-8 Zinc broMide
二乙基锌(约1mol/L的己烷溶液) 557-20-0 Diethylzinc
氟化锌 7783-49-5 Zinc fluoride
氧化锌;白铅粉 1314-13-2 Zinc oxide
磷酸二氢锌 13598-37-3 Zinc phosphate Monobasic;Zinc dihydrogen phosphate
七水合硫酸锌 7446-20-0 Zinc sulfate heptahydrate
锌试剂;邻[2-(2-羟基-5-磺基苯偶氮)亚苄基]肼基苯甲酸;5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲NFDB9;2-羧基-2″-羟基-5″-磺基苯鐕基苯 62625-22-3 Zincon;2-Carboxy-2′-hydroxy-5′-sulfoforMazylbenzene;1-(2′-Hydroxy-5′-sulfophenyl)-3-phenyl-5-(2″-carboxyphenyl)forMazan;5-(o-Carboxyphenyl)-1-(2-hydroxy-5-sulfophenyl)-3-phenyl forMazan
氢氧化锆;偏锆酸 14475-63-9 ZirconiuM hydroxide
αlyc
α-甲基-D-甘露糖苷;甲基α-D-吡喃甘露糖苷 617-04-9 α-Methyl-D-Mannoside;α-Methyl-D-Mannopyranoside
α-甲基苯乙烯;异丙烯苯;α-甲基苏合香烯;1-甲基-1-苯乙烯;2-苯丙烯 98-83-9 α-Methylstyrene
α-萘红;4-苯基偶氮-1-萘胺;苯基偶氮-1-萘胺;萘基红;苯偶氮-α-萘胺 131-22-6 α-Naphthyl red;4-Phenylazo-1-naphthylaMine; Benzeneazo-1-naphthylaMine; BAN; C.I. 11350
β-龙胆二糖;龙胆二糖;6-O-β-D-吡喃葡糖(苷)基-D-葡萄糖 554-91-6 β-Gentiobiose;6-O-β-D-Glucopyranosyl-D-glucose;6-(β-D-Glucosido)-D-glucose;AMy-gdalose
β-乳糖 5965-66-2 β-Lactose
(-)-表没食子酸儿茶素(+4℃) 970-74-1 (-)-Epigallocatechin

操作步骤(仅供参考):  
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:  
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
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