b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NAG测试盒

发布时间:2021-08-11
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,研发,*技术研发团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称:b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NAG测试盒
检测方法:盒
规格:50管/24样

样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品:
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、纯水。
β-淀粉酶

 通用规则:

1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

过硫酸钠;高硫酸钠;过二硫酸钠;二硫八氧酸钠;过硫酸碱 7775-27-1 SodiuM persulfate
磷钨酸钠 51312-42-6 SodiuM phosphotungstate;SodiuMdodecatungsto phosphate;SodiuM tungstophosphate
聚丙烯酸钠 9003/4/7 SodiuM polyacrylate
丙酸钠 137-40-6 SodiuM Propionate;Mycoban;IMpedex
焦硫酸钠 13870-29-6 SodiuM pyrosulfate;SodiuM anhydrosulfate
丙酮酸钠(+4℃) 113-24-6 Sodium pyruvate
水杨酸钠 54-21-7 SodiuM Salicylate;SodiuM o-hydroxybenzoate
硬脂酸钠;十八酸钠 822-16-2 SodiuM stearate
硫酸钠 7757-82-6 SODIUM SULFATE ANHYDROUS PESTANAL
碲酸钠 26006-71-3 SodiuM tellurate
亚碲酸钠 10102-20-2 SodiuM tellurite
四硼酸钠. 十水 1303-96-4 Sodium tetraborate decahydrate
无水四硼酸钠 1330-43-4 Sodium tetraborate
四苯硼钠;四苯硼酸钠 143-66-8 SodiuM tetraphenylborate;Tetraphenylboron sodiuM;Kalignost;NaTBP 
溴酸钠 7789-38-0 SodiuMbroMate
亚硫酸氢钠;酸式亚硫酸钠;重亚硫酸钠 7631-90-5 SodiuMhydrogen sulfite;SodiuM bisulfite
偏重亚硫酸钠;焦亚硫酸钠 7681-57-4 SodiuMMetabisulfite;SodiuM disulfite
偏磷酸钠;二缩原偏磷酸钠 7785-84-4 SodiuMMetaphosphate
溶剂蓝 63;四乙基罗丹明丁酯 6408-50-0 Solvent Blue 63(1-(MethylaMino)-4-[(3-Methylphenyl)aMino]anthraquinone)
山梨酸;1,3-戊二烯-1-羧酸;花楸酸;清凉茶酸 110-44-1 Sorbic Acid (AS);1,3-Pentadiene-1-carboxylic acid
黄豆粉 68308-36-1 Soya bean Meal;
鲸蜡;鲸脑油 540-10-3 SperMaceti;SperMwax
淀粉 9005-25-8 STARCH
可溶淀粉 9005-84-9 Starch soluble
硫酸链霉素 3810-74-0 StreptoMycin Sulfate
乙酸锶;醋酸锶 543-94-2 StrontiuM acetate
碳酸锶 1633-05-2 StrontiuM carbonate
硫酸锶;天青石 7759/2/6 StrontiuM sulfate;Celestine
7440-24-6 StrontiuM;
三氯蔗糖 56038-13-2 Sucralose
蔗糖 57-50-1 Sucrose(100Mg)
苏丹黑B 4197-25-5 Solvent Black 3
苏丹I;苯基(偶氮-1)-2-羟基萘;一号苏丹红;苯基偶氮-2-萘酚;苯偶氮苯酚 842-07-9 Sudan I;Solvent yellow 14;Sudan yellow;Oil orange;1-Phenylazo-2-naphthol;Benzene-(azo-1)-2-hydroxynaphthalene;Benzene-azo-β-naphthol;C.I. 12055
b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NAG测试盒苏丹红II 3118-97-6 SUDAN II
乙酸铅;三水合乙酸铅;醋酸铅;铅糖 6080-56-4 Sugar of lead;Salt of saturn;Neutral lead acetate

操作步骤(仅供参考):  
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:  
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
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