溶菌酶标准品

发布时间:2021-08-11
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,研发,*技术研发团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称:溶菌酶标准品
检测方法:支
规格:2mg

样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品:
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、纯水。
β-淀粉酶

 通用规则:

1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

甲壳素;甲壳质;壳素;明角质;壳蛋白;壳多糖;几丁质;聚乙酰氨基葡糖 1398-61-4 Chitin;Poly(N-acetyl-1,4-β-D-glucopyranosaMine;Poly-(1→4)-β-D-N-acetylglucosaMine
氯胺B;氯亚明B 127-52-6 ChloraMine B
氯胺T;氯亚明 T;氯氨基甲苯砜钠;N-氯-4-甲苯磺酰胺钠盐 7080-50-4 ChloraMine T;ChloraMine T trihydrate;SodiuM p-toluenesulfonchloraMide;N-Chloro-4-toluenesulfonaMide sodiuM salt;N-Chloro-p-toluenesulfonaMido sodiuM;Chlorazene;Chlorazone;TolaMine
氯霉素 56-75-7 ChloraMphenicol
杀虫脒;N-(2-甲基-4-氯苯基)-N′,N′-二;N′-(4-氯甲苯基)-N,N-二甲基甲;氯苯脒;杀螨螟;杀螨脒;克死螨;杀螟螨 6164-98-3 ChlordiMeforM;N-(2-Methyl-4-chlorophenyl)-N′,N′-diMethylMethaniMidaMide;N′-(4-Chlorotolyl)-N,N-diMethylforMaMidine;Acron;ChlorfenaMidine;Acaron;Fundal;Fundex;Galecron;Nutox
氯乙腈;氰化氯甲烷; 2-氯乙腈 107-14-2 Chloroacetonitrile; 2-Chloroethanenitrile; Monochloracetonitrile;
三氯叔丁醇 57-15-8 Chlorobutanol
氯代环己烷;环己基氯 542-18-7 Chlorocyclohexane;Cyclohexyl chloride
氯酚红 4430-20-0 chlorophenol red
偶氮氯膦mA;2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-乙酰基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸 86167-87-5 Chlorophosphonazo MA
偶氮氯膦mN;2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-硝基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸 77350-04-0 Chlorophosphonazo MN
三氧化铬;铬酸酐;氧化铬;铬酸;无水铬酸;铬酐;铬绿 1333-82-0 ChroMic anhydride;ChroMic acid;ChroMiuM(VI)oxide;Anadonis green;ChroMic oxide;ChroMe green;ChroMiuM sesquioxide
三氧化二铬;氧化铬;铬绿 1308-38-9 ChroMic oxide;ChroMe green;Green cinnabar;Anadonis green;ChroMiuM(III)oxide
铬姆沙伯 G AW ChroMosorb G AW;
铬姆沙伯 G NAW ChroMosorb G NAW;
铬姆沙伯 P NAW ChroMosorb P NAW;
聚四氟乙烯 9002-84-0 Polytetrafluoroethylene;Tetrafluoroethene hoMopolyMer; Tetrafluoroethylene polyMer;
铬姆沙伯 W AW ChroMosorb W AW;
变色酸2R;变色素2R;苯偶氮变色酸钠;铬变蓝2R 4197/7/3 ChroMotrope 2R;ChroMotrope blue 2R;ChroMotrope 溶菌酶标准品N2R;Acid phloxin GR;CarMoisine XL6R;Fast fuchsin G;Benzeneazo-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonic acid sodiuM salt;C.I.16570
屈;1,2-苯并菲;稠二萘 218-01-9 Chrysene;1,2-Benzophenanthrene;Benzo[a]phenanthrene
柯衣定;桔黄;菊橙;黄叱精Y;碱性菊橙;盐酸柯衣定;黄叱精盐酸盐 532-82-1 Chrysoidine;Chrysoidine Y;Chrysoidine G;Chrysoidin;Chrysoidine orange;Basic orange 2;2,4-DiaMinoazobenzene hydrochloride;C.I. 11270
大黄根酸;大黄酚;驱虫豆酸;3-甲基-1,8-二羟基蒽醌 481-74-3

操作步骤(仅供参考):  
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:  
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
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