柠檬酸合成酶CS活性测试盒

发布时间:2021-08-11
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,研发,*技术研发团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称:柠檬酸合成酶CS活性测试盒
检测方法:盒
规格:20T 50T


样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品:
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、纯水。
β-淀粉酶

 通用规则:

1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

产品名称:柠檬酸合成酶CS活性测试盒
检测方法:盒
规格:20T 50T 3090-36-6 tributyl(lauroyloxy)stannane
二氯三(1,10-邻二氮杂菲)钌(Ⅱ)水合 304695-79-2 PHENANTHROLINE RUTHENIUM DICHLORIDE, HYDRATE
2-羟基苯甲酸单铵盐 31295-34-8 AMMONIUM SALICYLATE
硝酸钯 313222-87-6 PALLADIUM(II) NITRATE HYDRATE
四苯硼钾 3244-41-5 POTASSIUM TETRAPHENYLBORATE 97
三氟-1-(2-呋喃基)-1,3-丁二酮 326-90-9 4,4,4-TRIFLUORO-1-(2-FURYL)-1,3-BUTANEDIONE
2,5-二硝基苯酚(加约20%水湿润,本品干重约为5g) 329-71-5 2,5-DINITROPHENOL
4,4’-二氟二苯甲酮 345-92-6 Bis(4-fluorophenyl)-methanone
二硫代苏糖醇(2-8℃) 3483/12/3 DL-1,4-Dithiothreitol
(R)-1-(4-氟苯基)乙胺 374898-01-8 (R)-1-(4-Fluorophenyl)ethylamine
2-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(+4°C) 369-07-3 2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside
N-(2-甲氧基乙基)甲基胺 38256-93-8 N-(2-METHOXYETHYL)METHYLAMINE
3-氟苯胺 372-19-0 3-Fluoroaniline
砷酸铅 3687-31-8 LEAD(II) ARSENATE
三氟乙酰丙酮;1,1,1-三氟-2,4-戊二酮 367-57-7 Trifluoroacetylacetone;1,1,1- Trifluoro acetyl acetone;TAA
氢氯二茂锆 37342-97-5 Bis(cyclopentadienyl)zirconium chloride hydride
1118-14-5 acetic acid: trimethyltin
α-酮戊二酸;α-胶酮酸;丙酮二羧酸;3-氧代-戊二酸 378-50-7 α-Ketoglutaric acid;2-Oxopentanedioic acid;2-Oxo-1,5-pentanedioic acid
3-METHOXYMETHYLDOPA
表儿茶素 490-46-0 (-)-EPICATECHIN(2-8℃)
(-)-鹰爪豆碱 90-39-1 (-)-SPARTEINE
甲氨蝶呤相关物质B 54-62-6 Methotrexate Related CoMpound B;(S)-2-{4-[2,4-diaMinopteridin-6yl)MethylaMino]benzoaMido}pentanedioic acid
(+/-)-2-氯丙酸98% 598-78-7 2-Chloropropionic acid
(±)新烟碱 13078-04-1 (-)-ANABASINE
(2-氯乙基)磷酸二乙酯 NA
(3-氯丙基)三甲基硅烷,98% 2344-83-4 (3-CHLOROPROPYL)TRIMETHYLSILANE
柠檬酸合成酶CS活性测试盒(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺 196929-78-9 (R)-(+)-2-Methyl-2-propanesulfinamide
(RS)-1H-吲哚-2-羧酸 78348-24-0 Indoline-2-carboxylic acid
(S)-(-)- 2-氯丙酸 29617-66-1 (S)-(-)-2-





操作步骤(仅供参考):  
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:  
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
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