实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
产品名称：土壤短芽孢杆菌
拉丁文: Brevibacillus
agri
提供形式: 冻干物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 产果胶酶
培养基: 营养肉汁琼脂：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。
生长条件: 37℃，好氧
存储条件: 真空冷冻干燥法
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产品名称 |
土壤短芽孢杆菌 |
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英文名称 |
Brevibacillus agri |
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货号 |
FS-J63915 |
公司代理ATCC菌种， 质量保证，为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种培养：产品仅用于科研
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。
CM-R005大鼠气管平滑肌细胞完全培养基100mL(AR)质量规格：>99.5%,AR iodide
IL22RA1 Others Canine 狗 IL22RA1 / IL22R 细胞裂解液 (阳性对照) 可溶性淀粉质量规格：BRStarch soluble
主动脉成纤维细胞HAF链脲佐菌素（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Streptozocin
3T3-L1细胞，小鼠脂肪细胞 癌细胞,MCF-7(NEW)细胞 大鼠星形胶质细胞RA硝酸硫康唑质量规格：>98.0%,JP2002Sulconazle Nitrate
新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF硝酸硫康唑(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Sulconazle Nitrate
选择性巧克力平板 Selectivity chocolate Plate 10块 胚肺成纤维细胞;MRC-5
GFRA3 Others Human GFRA3 / GFR-alpha-3 细胞裂解液 (阳性对照) 壬酸(Standard for GC ,>99%(GC))质量规格：Standard for GC ,>99%(GC) Nonoic acid
SV40转染成骨细胞;hFOB 1.19正辛醇(Standard for GC,>99.5%)质量规格：Standard for GC,>99.5%n-Octanol
食道上皮细胞(HEEC)(5×105 )十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.0%(GC)Undecanoic acid
CL-0390NCI-H1703(肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Undecanone
肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化细胞完全培养基 100mL顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸甲酯(标准品)质量规格：分析标准品cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid
methyl ester
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae 路德类酵母
黄绿青霉 哈茨木霉
白灵菇（白灵侧耳） 状毛霉
营养肉汤培养基7ml 多型孢毛霉
黑曲霉 丝球毛霉
保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于*适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法：
① 土壤短芽孢杆菌低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*广的微生物保存法。
