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英文简称:MM96L细胞
产品名称:黑色素瘤细胞
规格:黑色素瘤;淋巴结转移;女性
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
操作步骤:一.培养基及培养冻存条件准备:
准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根据实验需要选THB Medium
PS琼脂 250g 用于消化球菌的培养
PS Agar
肠球菌肉汤 250g 用于肠球菌增菌培养
Enterococcus Broth
脑心浸萃液肉汤 250g 用于营养苛求细菌的增菌培养
Brain Heart Infusion Broth
脑心浸液琼脂(BHIA) 250g 用于营养苛求细菌的增菌培养
Brain Heart infusion Agar
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂) 250g 用于粪链球菌的选择性分离和计数(SN标准)
Pfizer Enterococcus Selective Agar
MEI培养基 1000ml 用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌
MEI Medium
肠球菌琼脂(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂) 250g 用于食品和水中肠球菌的计数。
Bile Aesculin Azide Agar
6.5%NaCl葡萄糖琼脂 250g 用于肠球菌高盐耐受生长试验
6.5% NaCl Dextrose Agar
哥伦比亚血琼脂基础(改良) 250g 用于链球菌等苛求菌培养
乙基紫叠氮钠肉汤(litsky肉汤) 250g 用于链球菌增菌培养
叠氮葡萄糖肉汤 250g 用于链球菌增菌培养
草酸钾兔血浆 0.2ml*20 用于溶血性链球菌的检验
Potassium Oxalate In Rabbit Plasma
MC培养基(不含琼脂) 250g 用于嗜热链球菌增菌培养
金黄色葡萄球菌检验检验培养基
Baird-Parker琼脂基础 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(GB、SN标准)
兔血浆 0.5ml*10 用于金黄色葡萄球菌凝固酶试验
DNA酶琼脂 100 用于核糖核酸酶检测
DNase Agar
肠毒素产毒培养基 250g 用于金黄色葡萄球菌肠毒素产毒试验
Enterotoxin toxin-producing medium
亚碲酸钠肉汤培养基基础 250g 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养。每100ml培养基需另加入1%亚碲酸钠1ml
Sodium Tellurite Broth Base
葡萄球菌增菌肉汤 250g 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌
Staphylococcus Enrichment Broth
甲苯胺蓝-DNA酶琼脂 100 用于核糖核酸酶检测
Toluidine Blue DNAse Agar
甘露醇盐琼脂 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
哥伦比亚CNA琼脂基础 250g 用于分离革兰氏阳性球菌
Columbia CAN Agar Base
葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN琼脂) 250g 用于金黄色葡萄球菌的分离培养
Staphylococcus Selective Agar 10