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英文简称:HT115细胞
产品名称:结肠癌细胞
规格:结肠癌
形态特性:1640
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
猪8异前列腺素ELISA检测试剂盒
8-iso-PG
8-iso-PG
62.5pg/ml2000pg/ml
10
猪单核细胞趋化蛋白1ELISA检测试剂盒
MCP-1;CCL2
Monocyte chemotactic protein 1
62.5pg/ml2000pg/ml
10
猪多巴胺ELISA检测试剂盒
DA
dopamine
125pg/ml4000pg/ml
10
猪萎缩性鼻炎抗原ELISA检测试剂盒
atrophicrhinitis
atrophicrhinitis
0
10
猪Ⅲ型胶原ELISA检测试剂盒
ColⅢ
Collagen Type Ⅲ
12.5ng/ml400ng/ml
1
猪I型胶原ELISA检测试剂盒
ColI
Collagen Type I
125pg/ml4000pg/ml
10
猪口蹄疫抗凝抗体ELISA检测试剂盒
FMDAC
Foot-and-mouth disease virus anticoagulant
0
10
猪胃泌素ELISA检测试剂盒
Gas
Gastrin
25pg/ml800pg/ml
1
猪氢-钾-ATP酶ELISA检测试剂盒
H+-K+-ATPase
H+-K+-ATPase
6.25U/L200U/L
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测试剂盒
PRRS Ab
Reproductive and respiratory syndrome virus antibody
0
10
猪脑源性神经营养因子ELISA检测试剂盒
BDNF
Brain derived neurotrophic facor
12.5ng/ml400ng/ml
1
猪血管内皮生长因子AELISA检测试剂盒
VEGFA
Vascular Endothelial cell Growth Factor A
20pg/mL640pg/mL
1
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒
ToxAb
Tox antibody
0
10
猪副伤寒沙门氏菌抗体ELISA检测试剂盒
SP Ab
S.paratyphi Antibody
0
10
猪低氧诱导因子1ELISA检测试剂盒
HIF1
hypoxia-inducible factor1
62.5pg/ml2000pg/ml
10
猪瘟病毒非结构蛋白NS2抗体ELISA检测试剂盒
CSFV-NS2 Ab
Classical swine fever virus NS2 Antibody
0
10
猪硫酸雌酮ELISA检测试剂盒
E1S
Estrone sulfate
62.5pg/mL2000pg/mL
10
猪前列腺素F2aELISA检测试剂盒
PGF2a
Prostaglandin F2α
25pg/ml800pg/ml
1
猪甲状旁腺素ELISA检测试剂盒
PTH
Parathyroid hormone
18.75pg/ml600pg/ml
1
猪25羟基维生素D3ELISA检测试剂盒
25 HVD3
25-hydroxy vitamin D3
2.5μg/L80μg/L
0.1
猪肉绦虫ELISA检测试剂盒
TS
Taenia solium
0
10
猪白细胞介素2受体αELISA检测试剂盒
IL-2Rα
IL-2Rα
31.25pg/ml1000pg/ml
1
猪囊尾蚴IgG抗体ELISA检测试剂盒
Cy-IgG
Cysticercus-IgG
12.5ng/ml400ng/ml
1
猪胰脂肪酶ELISA检测试剂盒
PL
pancreatic lipase
6.25ng/ml200ng/ml
1
猪圆环病毒抗体ELISA检测试剂盒
PCV-Ab
circovirus antibody
12.5ng/ml400ng/ml
1
猪戊肝病毒抗体ELISA检测试剂盒
HEV-Ab
hepatitis E virus antibody
0
10
猪流感病毒抗体ELISA检测试剂盒
EIV-Ab
Equine innuenza Virus antibody
0
10
猪白细胞介素12ELISA检测试剂盒
IL-12;P40
Interleukin 12
12.5pg/ml400pg/ml
1
猪硒蛋白P1ELISA检测试剂盒
SEPP1
selenoprotein 1
2.5ng/ml80ng/ml
0.1
猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒
CSFV-Ab
Classical swine fevervirus antibody
0
10
猪流行性腹泻病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒
PEDV-IgG
epidemic diarrhea virus IgG antibody
50ng/ml1600ng/ml
10
猪流行性腹泻病毒IgA抗体ELISA检测试剂盒
PEDV-IgA
epidemic diarrhea virus IgA antibody
15ng/ml480ng/ml
1
猪蓝耳病病毒GP5蛋白抗体ELISA检测试剂盒
PRRSV-GP5
PRRSV-GP5
6.25ng/ml200ng/ml
1
猪血管紧张素IELISA检测试剂盒
Ang-I
angiotension Ⅰ
31.25pg/ml1000pg/ml
1
猪促甲状腺素ELISA检测试剂盒
TSH
Thyroid Stimulating Hormone
0.75μIU/ml24μIU/ml
0.1
猪Lys63特异性去泛素化酶BRCC36ELISA检测试剂盒
BRCC3
BRCC3
125pg/ml4000pg/ml
10
猪口蹄疫VP1结构蛋白ELISA检测试剂盒
FMDV-VP1
FMDV-VP1
0.625ng/ml20ng/ml
0.1
HT115细胞猪去泛素化酶ELISA检测试剂盒
UPS
ubiquitin-proteasome system
125pg/ml4000pg/ml
10
猪分泌型免疫球蛋白MELISA检测试剂盒
sIgM
secretory immunoglobulin M
0.375μg/mL12μg/mL
0.1
猪沉默调节蛋白1ELISA检测试剂盒
SIRT1
Sirtuin 1
0.625ng/ml20ng/ml
0.1
猪沉默调节蛋白2ELISA检测试剂盒
SIRT2
Sirtuin 2
1ng/ml32ng/ml
0.1
猪沉默调节蛋白3ELISA检测试剂盒
SIRT3
Sirtuin 3
0.25ng/ml8ng/ml
0.1
猪沉默调节蛋白4ELISA检测试剂盒
SIRT4
Sirtuin 4
125pg/ml4000pg/ml
10