HT115细胞

发布时间:2021-08-18

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英文简称:HT115细胞
产品名称:结肠癌细胞
规格:结肠癌
形态特性:1640
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

猪8异前列腺素ELISA检测试剂盒 8-iso-PG 8-iso-PG 62.5pg/ml2000pg/ml 10
猪单核细胞趋化蛋白1ELISA检测试剂盒 MCP-1;CCL2 Monocyte chemotactic protein 1 62.5pg/ml2000pg/ml 10
猪多巴胺ELISA检测试剂盒 DA dopamine 125pg/ml4000pg/ml 10
猪萎缩性鼻炎抗原ELISA检测试剂盒 atrophicrhinitis atrophicrhinitis 0 10
猪Ⅲ型胶原ELISA检测试剂盒 ColⅢ Collagen Type Ⅲ 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪I型胶原ELISA检测试剂盒 ColI Collagen Type I 125pg/ml4000pg/ml 10
猪口蹄疫抗凝抗体ELISA检测试剂盒 FMDAC Foot-and-mouth disease virus anticoagulant 0 10
猪胃泌素ELISA检测试剂盒 Gas Gastrin 25pg/ml800pg/ml 1
猪氢-钾-ATP酶ELISA检测试剂盒 H+-K+-ATPase H+-K+-ATPase 6.25U/L200U/L 1
猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测试剂盒 PRRS Ab Reproductive and respiratory syndrome virus antibody 0 10
猪脑源性神经营养因子ELISA检测试剂盒 BDNF Brain derived neurotrophic facor 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪血管内皮生长因子AELISA检测试剂盒 VEGFA Vascular Endothelial cell Growth Factor A 20pg/mL640pg/mL 1
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒 ToxAb Tox antibody 0 10
猪副伤寒沙门氏菌抗体ELISA检测试剂盒 SP Ab S.paratyphi Antibody 0 10
猪低氧诱导因子1ELISA检测试剂盒 HIF1 hypoxia-inducible factor1 62.5pg/ml2000pg/ml 10
猪瘟病毒非结构蛋白NS2抗体ELISA检测试剂盒 CSFV-NS2 Ab Classical swine fever virus NS2 Antibody 0 10
猪硫酸雌酮ELISA检测试剂盒 E1S Estrone sulfate 62.5pg/mL2000pg/mL 10
猪前列腺素F2aELISA检测试剂盒 PGF2a Prostaglandin F2α 25pg/ml800pg/ml 1
猪甲状旁腺素ELISA检测试剂盒 PTH Parathyroid hormone 18.75pg/ml600pg/ml 1
猪25羟基维生素D3ELISA检测试剂盒 25 HVD3 25-hydroxy vitamin D3 2.5μg/L80μg/L 0.1
猪肉绦虫ELISA检测试剂盒 TS Taenia solium 0 10
猪白细胞介素2受体αELISA检测试剂盒 IL-2Rα IL-2Rα 31.25pg/ml1000pg/ml 1
猪囊尾蚴IgG抗体ELISA检测试剂盒 Cy-IgG Cysticercus-IgG 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪胰脂肪酶ELISA检测试剂盒 PL pancreatic lipase 6.25ng/ml200ng/ml 1
猪圆环病毒抗体ELISA检测试剂盒 PCV-Ab circovirus antibody 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪戊肝病毒抗体ELISA检测试剂盒 HEV-Ab hepatitis E virus antibody 0 10
猪流感病毒抗体ELISA检测试剂盒 EIV-Ab Equine innuenza Virus antibody 0 10
猪白细胞介素12ELISA检测试剂盒 IL-12;P40 Interleukin 12 12.5pg/ml400pg/ml 1
猪硒蛋白P1ELISA检测试剂盒 SEPP1 selenoprotein 1 2.5ng/ml80ng/ml 0.1
猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒 CSFV-Ab Classical swine fevervirus antibody 0 10
猪流行性腹泻病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒 PEDV-IgG epidemic diarrhea virus IgG antibody 50ng/ml1600ng/ml 10
猪流行性腹泻病毒IgA抗体ELISA检测试剂盒 PEDV-IgA epidemic diarrhea virus IgA antibody 15ng/ml480ng/ml 1
猪蓝耳病病毒GP5蛋白抗体ELISA检测试剂盒 PRRSV-GP5 PRRSV-GP5 6.25ng/ml200ng/ml 1
猪血管紧张素IELISA检测试剂盒 Ang-I angiotension Ⅰ 31.25pg/ml1000pg/ml 1
猪促甲状腺素ELISA检测试剂盒 TSH Thyroid Stimulating Hormone 0.75μIU/ml24μIU/ml 0.1
猪Lys63特异性去泛素化酶BRCC36ELISA检测试剂盒 BRCC3 BRCC3 125pg/ml4000pg/ml 10
猪口蹄疫VP1结构蛋白ELISA检测试剂盒 FMDV-VP1 FMDV-VP1 0.625ng/ml20ng/ml 0.1
HT115细胞猪去泛素化酶ELISA检测试剂盒 UPS ubiquitin-proteasome system 125pg/ml4000pg/ml 10
猪分泌型免疫球蛋白MELISA检测试剂盒 sIgM secretory immunoglobulin M 0.375μg/mL12μg/mL 0.1
猪沉默调节蛋白1ELISA检测试剂盒 SIRT1 Sirtuin 1 0.625ng/ml20ng/ml 0.1
猪沉默调节蛋白2ELISA检测试剂盒 SIRT2 Sirtuin 2 1ng/ml32ng/ml 0.1
猪沉默调节蛋白3ELISA检测试剂盒 SIRT3 Sirtuin 3 0.25ng/ml8ng/ml 0.1
猪沉默调节蛋白4ELISA检测试剂盒 SIRT4 Sirtuin 4 125pg/ml4000pg/ml 10

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