NCI-H322H322细胞

发布时间:2021-08-18

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英文简称:NCI-H322[H322]细胞
产品名称:非小细胞肺癌细胞
规格:非小细胞肺癌
形态特性:1640
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

猪圆环病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒 PCVAb circovirus antibody 0 10
猪环氧合酶ELISA检测试剂盒 COX cyclooxygenase 7.5U/L240U/L 1
猪卵黄免疫球蛋白ELISA检测试剂盒 IgY IgY 62.5ng/ml2000ng/ml 10
猪醋酸甲孕酮ELISA检测试剂盒 DMPA depot medroxyprogesterone acetate 1.25ng/ml40ng/ml 0.1
猪圆环病毒2型ELISA检测试剂盒 PCV2 circovirus 2 0.5ng/mL16ng/mL 0.1
猪布氏杆菌ELISA检测试剂盒 Brucella Brucella 0 10
猪水泡病毒ELISA检测试剂盒 SVDV Swine Vesicular Disease Virus 0 10
猪白细胞介素1αELISA检测试剂盒 IL-1α Interleukin 1α 50pg/ml1600pg/ml 10
猪髓过氧化物酶ELISA检测试剂盒 MPO myeloperoxidase 25ng/ml800ng/ml 1
猪血清补体ELISA检测试剂盒 CH50 50% complement hemolysis 6.25U/ml200U/ml 1
猪链球菌2型ELISA检测试剂盒 SS2 Streptococcus suis serotype 2 0 10
猪I型原胶原C端前肽ELISA检测试剂盒 PICP C.Terminal Propeptide of type I Collagen 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪乙酰辅酶AELISA检测试剂盒 ACA Acetyl CoA 1.25ng/ml40ng/ml 0.1
猪组蛋白去乙酰化酶ELISA检测试剂盒 HDAC Histone Deacetylase 2ng/ml64ng/ml 0.1
猪Acds酰基辅酶A脱氢酶ELISA检测试剂盒 AACAD Acds Acyl coenzyme A dehydrogenase 0.625ng/ml20ng/ml 0.1
猪6酮前列腺素F1aELISA检测试剂盒 6-keto-PGF1α 6-keto-prostaglandin F 1 α 25pg/ml800pg/ml 1
猪血管内皮细胞粘附分子ELISA检测试剂盒 VCAM Vascuolar cell adhesion molecule 25ng/ml800ng/ml 1
猪链球菌2型抗体ELISA检测试剂盒 SS2 Streptococcus suis serotype 2 31.25ng/ml1000ng/ml 1
猪免疫球蛋白IgGELISA检测试剂盒 IgG Immunoglobulin IGG 3.125ug/ml100ug/ml 0.1
猪免疫球蛋白IgAELISA检测试剂盒 IgA Immunoglobulin IGA 62.5pg/ml2000pg/ml 10
猪三价链球菌c型血清抗体ELISA检测试剂盒 SSCAb Streptococcus serotype c antibody 20ng/ml640ng/ml 1
猪三价链球菌7型血清抗体ELISA检测试剂盒 SS7Ab Streptococcus serotype 7 antibody 25ng/ml800ng/ml 1
猪糖化血红蛋白A1cELISA检测试剂盒 GHbA1c Glycated hemoglobin A1c 25ug/ml800ug/ml 1
猪口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒 FMDV Ab Foot and mouth disease virus antibody 25ng/ml800ng/ml 1
猪O型口蹄疫ELISA检测试剂盒 FMD-O Foot-and-mouth disease virus O 18.75ng/ml600ng/ml 1
猪胃抑素ELISA检测试剂盒 GIP gastric inhibitory polypeptide 25pg/mL800pg/mL 1
猪O型口蹄疫VPI抗体ELISA检测试剂盒 OTDVAb O type foot-and-mouth disease virus VPI antibody 0 10
NCI-H322[H322]细胞猪碱性成纤维细胞生长因子2ELISA检测试剂盒 bFGF2 basic fibroblast growth factor 2 12.5pg/ml400pg/ml 1
猪支原体抗体ELISA检测试剂盒 MAb Mycoplasma antibody 25ng/ml800ng/ml 1
猪甲状腺球蛋白ELISA检测试剂盒 TG Thyroglobulin 6.25ng/ml200ng/ml 1
猪小反刍兽疫抗体ELISA检测试剂盒 PPR peste des petits ruminants 25ng/ml800ng/ml 1
猪硫代巴比土酸反应物质ELISA检测试剂盒 TBARS TBARS 6.25nmol/mL200nmol/mL 1
猪蓝舌病ELISA检测试剂盒 BT bluetongue 0 10
猪20羟二十烷四烯酸ELISA检测试剂盒 20-HETE 20-hydroxyeicosatetraenoic acid 6.25ng/ml200ng/ml 1
猪胰蛋白酶原ELISA检测试剂盒 Try trypsinogen 2.5U/ml80U/ml 0.1
猪糜蛋白酶原ELISA检测试剂盒 CTR Chymotrypsinogen 2U/ml64U/ml 0.1
猪程序性死亡-1抗体ELISA检测试剂盒 PD-1Ab PD-1Ab 25ng/ml800ng/ml 1
猪程序性死亡因子配体1抗体ELISA检测试剂盒 PDL1-Ab PDL1-Ab 12.5ng/ml400ng/ml 1
猪凝血因子XIIIELISA检测试剂盒 FⅩⅢ coagulation factor ⅩⅢ 125ng/ml4000ng/ml 10

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