OK细胞

发布时间:2021-08-19

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英文简称:OK细胞
产品名称:负鼠肾细胞
规格:肾
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

豚鼠三叶因子2ELISA检测试剂盒 TFF2 Trefoil Factor-2 2.5pg/mL80pg/mL 0.1
豚鼠三叶因子3ELISA检测试剂盒 TFF3 Trefoil Factor-3 50pg/mL1600pg/mL 10
豚鼠5-羟色胺转运体ELISA检测试剂盒 SERT Serotonin Transporter? 50pg/mL1600pg/mL 10
豚鼠5羟色胺1AELISA检测试剂盒 5-HT1A 5-Hydroxytryptamine 1A 7.5ng/ml240ng/ml 1
豚鼠诱导型NO合酶ELISA检测试剂盒 iNOS inducible nitric oxide synthase 0.75ng/ml24ng/ml 0.1
蛙三碘甲状腺原氨酸ELISA检测试剂盒 T3 Tri-iodothyronine 0.25ng/mL8ng/mL 0.1
蛙睾酮ELISA检测试剂盒 T Testoterone 0.625ng/ml20ng/ml 0.1
蛙雌二醇ELISA检测试剂盒 E2 Estradiol 43.75pg/ml1400pg/ml 1
蛙雌三醇ELISA检测试剂盒 E3 Estriol 31.25pg/ml1000pg/ml 1
蛙雌酮ELISA检测试剂盒 E Estrone 25pg/ml800pg/ml 1
蛙孕酮ELISA检测试剂盒 PROG Progesterone 0.9375ng/mL30ng/mL 0.1
蛙透明质酸ELISA检测试剂盒 HA Hyaluronic acid 5ng/mL160ng/mL 1
蛙甲状腺素ELISA检测试剂盒 T4 thyroxine 7.5nmol/L240nmol/L 1
蛙多巴胺ELISA检测试剂盒 DA dopamine 125pg/mL4000pg/mL 10
蛙肾上腺素ELISA检测试剂盒 EPI Epinephrine;Adrenaline 0.5ng/mL16ng/mL 0.1
蛙去甲肾上腺素ELISA检测试剂盒 NE Noradrenaline 3.75ng/mL120ng/mL 0.1
蛙5羟色胺ELISA检测试剂盒 5-HT 5-Hydroxytryptamine 0.75ng/mL24ng/mL 0.1
虾白斑症病毒双抗体夹心ELISA检测试剂盒 PWSSV Ab Prawn WSSV double antibody sandwich 0 10
虾GTP酶ELISA检测试剂盒 GTPase GTPase 3.125U/L100U/L 0.1
虾P糖蛋白;渗透性糖蛋白ELISA检测试剂盒 P-gp permeability glycoprotein 1.5ng/mL48ng/mL 0.1
虾维生素CELISA检测试剂盒 VC Vitamin C 2.5μmol/L80μmol/L 0.1
虾胃蛋白酶ELISA检测试剂盒 Pepsin Pepsin 10mIU/mL320mIU/mL 1
虾胰蛋白酶ELISA检测试剂盒 trypsin trypsin 7.5U/L240U/L 1
虾淀粉酶ELISA检测试剂盒 AMS amylase 12.5IU/L400IU/L 1
虾脂肪酶ELISA检测试剂盒 Lipase Lipase 25U/L800U/L 1
OK细胞虾丙二酰辅酶AELISA检测试剂盒 malonyl CoA malonyl CoA 3.75IU/L120IU/L 0.1
虾过氧化物酶体增殖物激活受体αELISA检测试剂盒 PPAR-α peroxisome proliferators activator receptors α 25pg/mL800pg/mL 1
虾过氧化物酶体增殖物激活受体βELISA检测试剂盒 PPAR-β peroxisome proliferβators activator receptors 156.25pg/mL5000pg/mL 10
虾乙酰辅酶A羧化酶ELISA检测试剂盒 ACC acetyl-CoA catboxylase 0.5U/L16U/L 0.1
虾细胞色素氧化酶ELISA检测试剂盒 CX Cytochrome oxidase 0.625U/L20U/L 0.1
虾琥珀酸脱氢酶ELISA检测试剂盒 SDH succinate dehydrogenase 15IU/L480IU/L 1
虾生长素ELISA检测试剂盒 IAA;Auxin Indole-3-acetic acid;Auxin 0.625μmol/L20μmol/L 0.1
虾补体蛋白3ELISA检测试剂盒 C3 Complement 3 5μg/mL160μg/mL 1
虾补体蛋白4ELISA检测试剂盒 C4 Complement 4 7.5μg/mL240μg/mL 1
虾肿瘤坏死因子αELISA检测试剂盒 TNF-α Tumor necrosis factor α 2.5pg/mL80pg/mL 0.1
虾白细胞介素1βELISA检测试剂盒 IL-1β Interleukin 1β 3.75pg/mL120pg/mL 0.1
虾细胞色素P4503A4ELISA检测试剂盒 CYP3A4 Cytochrome P4503A4 0.3125ng/mL10ng/mL 0.1
虾碳酸酐酶ELISA检测试剂盒 CA carbonic anhydrase 5.625IU/ml180IU/ml 1
线虫卵黄蛋白原ELISA检测试剂盒 VTG Vitellogenin 6.25ng/mL200ng/mL 1
线虫胶原蛋白ELISA检测试剂盒 Col Collagen 3.75ng/mL120ng/mL 0.1
线虫胶原蛋白IELISA检测试剂盒 Col I Collagen I 2ng/mL64ng/mL 0.1
线虫胶原蛋白IIELISA检测试剂盒 Col II Collagen II 1.25ng/mL40ng/mL 0.1

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