HBE135-E6E7细胞

发布时间:2021-08-19

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英英文简称:HBE135-E6E7细胞
产品名称:支气管上皮细胞
规格:支气管上皮细胞;HPV16转化;男性
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

兔载脂蛋白B100ELISA检测试剂盒 apo-B100 apoprotein B100 62.5ng/mL2000ng/mL 10
兔固醇调节元件结合蛋白ELISA检测试剂盒 SREBP2 Sterol Regulatory Element Binding proteins 25pg/mL800pg/mL 1
兔微粒体三酰甘油转移酶ELISA检测试剂盒 MTT Microsomal triglyceride transferase 62.5pg/mL2000pg/mL 10
兔微粒体甘油三酸酯转运蛋白ELISA检测试剂盒 MTTP Microsomal triglyceride transfer protein 50pg/mL1600pg/mL 10
兔弹性蛋白ELISA检测试剂盒 Elastin Elastin 1.25ng/ml40ng/ml 0.1
兔CD44分子ELISA检测试剂盒 CD44 Cluster of Differentiation 44 12.5ng/mL400ng/mL 1
兔脑啡肽ELISA检测试剂盒 ENK enkephalin 1.25ng/mL40ng/mL 0.1
兔类风湿因子ELISA检测试剂盒 RF rheumatoid factor 0.25ng/mL8ng/mL 0.1
兔胆红素ELISA检测试剂盒 TB Total bilirubin 0.5μmol/L16μmol/L 0.1
兔粘蛋白5ACELISA检测试剂盒 MUC5AC Mucin-5 subtype AC 0.25ng/mL8ng/mL 0.1
兔生长激素释放肽ELISA检测试剂盒 GHRP growth hormone releasing peptide-Ghrelin 62.5pg/mL2000pg/mL 10
兔炭疽杆菌抗体ELISA检测试剂盒 anthracis Ab anthracis antibody 0 10
兔糖化血红蛋白A1cELISA检测试剂盒 GHbA1c Glycated hemoglobin A1c 12.5ng/mL400ng/mL 1
兔α1抗胰蛋白酶ELISA检测试剂盒 α1-AT α1-AT 1.5625ug/mL50ug/mL 0.1
兔岩藻糖基化触珠蛋白ELISA检测试剂盒 FH Fucosylation haptoglobin 2μg/mL64μg/mL 0.1
兔糖化白蛋白ELISA检测试剂盒 GA Glycated Albumin 3.125ng/mL100ng/mL 0.1
兔Ⅱ型胶原蛋白ELISA检测试剂盒 ColⅡ Collagen TypeⅡ 0.375ng/mL12ng/mL 0.1
兔硒蛋白ELISA检测试剂盒 SEPP1 selenoprotein 125ng/mL4000ng/mL 10
兔硒蛋白PELISA检测试剂盒 Se-P selenoprotein P 62.5ng/mL2000ng/mL 10
兔甘油二酯ELISA检测试剂盒 DAG;DG diacyl glycerol 0.5ng/mL16ng/mL 0.1
兔白细胞介素17AELISA检测试剂盒 IL-17A Interleukin 17A 1.25pg/mL40pg/mL 0.1
兔胰蛋白酶ELISA检测试剂盒 trypsin trypsin 25ng/mL800ng/mL 1
兔淀粉酶ELISA检测试剂盒 AMS amylase 12.5pg/mL400pg/mL 1
兔胃蛋白酶ELISA检测试剂盒 Pepsin Pepsin 1.5ng/mL48ng/mL 0.1
兔纤维素酶ELISA检测试剂盒 CE Cellulase 125pg/mL4000pg/mL 10
兔胰蛋白酶ELISA检测试剂盒 trypsin trypsin 25U/L800U/L 1
兔淀粉酶ELISA检测试剂盒 AMS amylase 0.625U/L20U/L 0.1
兔胃蛋白酶ELISA检测试剂盒 Pepsin Pepsin 10U/L320U/L 1
兔纤维素酶ELISA检测试剂盒 CE Cellulase 3.125U/L100U/L 0.1
兔核因子κB抑制蛋白αELISA检测试剂盒 IKBα inhibitory subunit of NF-κBα 0.5ng/mL16ng/mL 0.1
兔激动异构酶;细胞分裂素MBELISA检测试剂盒 CKMB cytokinin MB 1.25ng/mL40ng/mL 0.1
兔ATP酶ELISA检测试剂盒 ATPase ATPase 0.625μmol/mL20μmol/mL 0.1
HBE135-E6E7细胞兔肌红蛋白ELISA检测试剂盒 MYO;MB Myoglobin 1.5ng/mL48ng/mL 0.1
兔促胰液素ELISA检测试剂盒 secretin secretin 6.25pg/mL200pg/mL 1
兔胆囊收缩素ELISA检测试剂盒 CCk cholecystokinin 10pg/mL320pg/mL 1
兔抑胃肽ELISA检测试剂盒 GIP gastric inhibitory polypeptide 31.25pg/mL1000pg/mL 1
兔胃动素ELISA检测试剂盒 MTL Motilin 62.5pg/mL2000pg/mL 10

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