L132 细胞

发布时间:2021-08-19

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英文简称:L132 细胞
产品名称:胚胎肺上皮细胞
规格:胚肺;女性
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

人低密度脂蛋白免疫复合物ELISA检测试剂盒 LDL-IC LDL immune complexes 1.25mmol/L~40mmol/L 0.1
人Egl九同源物ELISA检测试剂盒 EGLN Egl nine homolog 62.5pg/ml~2000pg/ml 10
人百日咳IgG抗体ELISA检测试剂盒 P IgG;WC IgG pertussis IgG,whooping cough IgG anitbody 25ng/ml~800ng/ml 1
人硒蛋白P1ELISA检测试剂盒 SEPP1 selenoprotein 1 0.625μg/mL~20μg/mL 0.1
人EB病毒IgA抗体ELISA检测试剂盒 Ebv IgA Ebv IgG antibody 0~ 10
人脯氨酰羟化酶ELISA检测试剂盒 EGLN prolyl hydroxylase 0.25ng/ml~8ng/ml 0.1
人脯氨酰羟化酶2ELISA检测试剂盒 PHD2 prolyl hydroxylase2 1.25ng/ml~40ng/ml 0.1
人风疹病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒 RV IgG rubella virus IgG 0~ 10
人流行性腮腺炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒 MU IgG Mumps Virus IgG 0~ 10
人神经丝中链蛋白MELISA检测试剂盒 NF-M NF-M 125pg/ml~4000pg/ml 10
人凝血因子Ⅷ相关抗原ELISA检测试剂盒 FⅧAg coagulation factor Ⅷ related antigen 25ng/ml~800ng/ml 1
人腮腺炎病毒IgM抗体ELISA检测试剂盒 MV-IgM mumps virus IgM 0~ 10
人水痘带状疱疹病毒IgM抗体ELISA检测试剂盒 VZV-IgM varicella-zoster virus IgM antibody 0~ 10
人RNA结合基元蛋白8ELISA检测试剂盒 RBM8 RNA-binding protein 8 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人CXC趋化因子配体1ELISA检测试剂盒 CXCL1 CXC-chemokine ligand 1 0.25ng/ml~8ng/ml 0.1
人轮状病毒ELISA检测试剂盒 RV rotavirus 0.25ng/ml~8ng/ml 0.1
人抗小鼠抗体ELISA检测试剂盒 HAMA HAMA 25ng/ml~800ng/ml 1
人核因子κB受体激活因子配体ELISA检测试剂盒 RANkL Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand 0.25ng/ml~8ng/ml 0.1
人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgM抗体ELISA检测试剂盒 HSVⅠ+Ⅱ-IgM Herpes simplex virus Ⅰ+Ⅱ IgM Antibody 0~ 10
人拓扑异构酶1ELISA检测试剂盒 TOP1 Topoisomerase I? 12.5mIU/mL~400mIU/mL 1
人单酰基甘油酯酶ELISA检测试剂盒 MAGL MonoacylglycerolLipase 0.625ng/ml~20ng/ml 0.1
人单酰基甘油酯酶ELISA检测试剂盒 MAGL MonoacylglycerolLipase 3.75U/L~120U/L 0.1
人SIGMAR1ELISA检测试剂盒 SIGMAR1 Sigma non-opioid intracellular receptor 1 0.3125ng/ml~10ng/ml 0.1
人激素敏感性脂肪酶ELISA检测试剂盒 HSL Hormone-sensitive lipase 0.3125ng/mL~10ng/mL 0.1
人脂肪甘油三酯脂酶ELISA检测试剂盒 ATGL Adipose Triglyceride Lipase 12.5mIU/ml~400mIU/ml 1
人血管生成素样蛋白4ELISA检测试剂盒 ANGPTL4 angiopoietin-like protein 4 3.125ng/ml~100ng/ml 0.1
人甲酰肽受体1ELISA检测试剂盒 FPR1 Formyl Peptide Receptor 1 0.25ng/ml~8ng/ml 0.1
人蛋白信号调节因子7ELISA检测试剂盒 RGS7 Regulator Of G Protein Signaling 7 6.25ng/ml~200ng/ml 1
人II型胶原纤维α基因ELISA检测试剂盒 COL11A2 Collagen alpha-2(XI) chain 0.3125ng/ml~10ng/ml 0.1
人肠道病毒71型IgG抗体ELISA检测试剂盒 EV71-IgG enterovirus-71 IgG 0~ 10
人神经丝蛋白HELISA检测试剂盒 NF-H Neurofilament protein H 1.25ng/ml~40ng/ml 0.1
人桥粒芯糖蛋白2ELISA检测试剂盒 DSG-2 Desmoglein 2 0.3125ng/ml~10ng/ml 0.1
人分泌簇集蛋白ELISA检测试剂盒 SCLU secretory clusterin 6.25ng/ml~200ng/ml 1
人CD20分子抗体ELISA检测试剂盒 CD20-Ab CD20 Antibody 0.625ug/ml~20ug/ml 0.1
人糖脂抗体ELISA检测试剂盒 glycolipid glycolipid 25ng/ml~800ng/ml 1
人胞裂蛋白9ELISA检测试剂盒 9-Sep Septin-9 2.5ng/mL~80ng/mL 0.1
L132 细胞人牛痘病毒IgMELISA检测试剂盒 VAV-IgM vaccinia Viruses IgM 0~ 10
人唾液睾酮ELISA检测试剂盒 T Testoterone 15pmol/L~480pmol/L 1
人趋化因子20ELISA检测试剂盒 CXCL20 C-X-C motif chemokine  20 62.5pg/ml~2000pg/ml 10
人趋化因子28ELISA检测试剂盒 CXCL28 C-X-C motif chemokine  28 37.5pg/ml~1200pg/ml 1
人空泡毒素相关蛋白A抗体ELISA检测试剂盒 VacAAb Vacuolating cytotoxin A antibody 0.625ng/mL~20ng/mL 0.1

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