实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
产品名称:小克银汉霉 斜面
拉丁文: Cunninghamella
echinulata
提供形式: 仅提供斜面
安全等级: 1
模式菌株: no
培养基: 综合PDA:20%马铃薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,琼脂 15g,pH 自然。
生长条件: 25-28℃,好氧
存储条件: 液氮低温冻结法;真空冷冻干燥法
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产品名称 |
小克银汉霉 斜面 |
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英文名称 |
Cunninghamella echinulata |
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货号 |
FS-J64452 |
公司代理ATCC菌种, 质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种培养:产品仅用于科研
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 香蒲新苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Typhaneoside
滋养层细胞生长添加物TGS香叶木素-7-O-葡萄糖苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside
VSIG2 Others Human VSIG2 细胞裂解液 (阳性对照) 香紫苏醇(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Sclareol
COS-7 非洲绿猴SV40 转化的肾细胞小檗碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Berberine
CL-0014A-375(恶性色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2香草醛(标准品)质量规格:>99%,标准品Vanillin
亚盐还原厌氧菌孢子液体培养基 250g 用于亚盐还原厌氧菌孢子的增菌培养。
LM3细胞,高转移肝癌细胞 小鼠白血病细胞,M1细胞 犬肾细胞;MDCK(NBL-2)
心肌细胞 (HCM) (1×106 )兰索拉唑质量规格:干品含量>98%,USP32Lansoprazole
CL-0003293A (胚肾细胞)5×106cells/瓶×2兰索拉唑(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Lansoprazole
小鼠小胶质细胞;BV2 小鼠支气管成纤维细胞完全培养基 100mL盐酸洛美沙星质量规格:>98.5%,BRLomefloxacin HCl
脐动脉平滑肌细胞 Human盐酸洛美沙星(标准品)质量规格:含量测定Lomefloxacin HCl
IL6ST Others
Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 细胞裂解液 (阳性对照) 氯替泼诺质量规格:>99.0%Loteprednol Etabonate
肉葡萄球菌 奇异变形杆菌
印第安那亚种Bacillusthuringiensissubsp.indiana 鲍氏志贺菌CMCC51522冻干粉
蛹虫草(北冬虫夏草、北虫草) 热带假丝酵母
醋酸醋杆菌 海滨芽孢杆菌
单增李斯特菌 白黄链霉菌
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于*适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
①小克银汉霉 斜面 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*广的微生物保存法。