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英文简称:HCA-rEpic细胞
产品名称:正常子宫颈上皮细胞
规格:子宫颈;上皮细胞
形态特性:1640
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒;
α2M ELISA Kit
α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒;
αHSG ELISA Kit
α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒;
α1M ELISA Kit
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒;
α1AGP ELISA Kit
α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA试剂盒;
α1ACT ELISA Kit
α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒;
α1AT ELISA Kit
α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA试剂盒;
α1BG ELISA Kit
HCA-rEpic细胞Zinedin蛋白(ZIN)ELISA试剂盒;
ZIN ELISA Kit
Zeste同源物增强子2(EZH2)ELISA试剂盒;
EZH2 ELISA Kit
Zeste同源物增强子1(EZH1)ELISA试剂盒;
EZH1 ELISA Kit
Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA试剂盒;
SUZ12 ELISA Kit
Y-染色体胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA试剂盒;
Tβ4Y ELISA Kit
YY肽3(PYY3)ELISA试剂盒;
PYY3 ELISA Kit
YY肽2(PYY2)ELISA试剂盒;
PYY2 ELISA Kit
YY肽(PYY)ELISA试剂盒;
PYY ELISA Kit
YY1转录因子(YY1)ELISA试剂盒;
YY1 ELISA Kit
YbeY金属肽酶(YBEY)ELISA试剂盒;
YBEY ELISA Kit
X-转运蛋白3(Xtrp3)ELISA试剂盒;
Xtrp3 ELISA Kit
X-转运蛋白2(Xtrp2)ELISA试剂盒;
Xtrp2 ELISA Kit
X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)ELISA试剂盒;
XRCC6 ELISA Kit
X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒;
XRCC5 ELISA Kit
X-脯氨酰氨肽酶3(XPNPEP3)ELISA试剂盒;
XPNPEP3 ELISA Kit
X-连锁凋亡蛋白抑制因子(XIAP)ELISA试剂盒;
XIAP ELISA Kit
X-框结合蛋白1(XBP1)ELISA试剂盒;
XBP1 ELISA Kit
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)ELISA试剂盒;
WFS1 ELISA Kit
WNT抑制因子1(WIF1)ELISA试剂盒;
WIF1 ELISA Kit
WNT1诱导信号通道蛋白2(WISP2)ELISA试剂盒;
WISP2 ELISA Kit
WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)ELISA试剂盒;
WISP1 ELISA Kit
Whirlin蛋白(WHRN)ELISA试剂盒;
WHRN ELISA Kit
WAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)ELISA试剂盒;
WFDC5 ELISA Kit
V-Yes-1Yamaguchi肉瘤病毒相关癌基因同源物(LYN)ELISA试剂盒;
LYN ELISA Kit
V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA试剂盒;
RELB ELISA Kit
V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒;
RELA ELISA Kit
V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA试剂盒;
MYC ELISA Kit
V-Myb髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)ELISA试剂盒;
MYB ELISA Kit
V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MAF)ELISA试剂盒;
MAF ELISA Kit
V-Ki-Ras2Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)ELISA试剂盒;
KRAS ELISA Kit
V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA试剂盒;
JUN ELISA Kit