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英文简称:NCI-H3255 细胞
产品名称:肺癌细胞
规格:肺癌;女性
形态特性:1640
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
p70 S6 kinase beta 英文名称: 核糖体蛋白S6激酶1抗体 0.2ml
SCNN1D 英文名称: 上皮钠离子通道蛋白D/δENaC抗体 0.2ml
Sorcin 英文名称: 抗药蛋白抗体 0.2ml
SPP24 英文名称: 分泌性磷蛋白24抗体 0.2ml
SORCS3 英文名称: 液泡蛋白分选受体SORCS3抗体 0.2ml
SOSSC 英文名称: 单链DNA结合蛋白相互作用蛋白1 0.2ml
SLC40A1 英文名称: 细胞膜铁转运蛋白FP1抗体 0.1ml
pan 14-3-3 英文名称: 14-3-3蛋白抗体 0.2ml
Synaptotagmin X 英文名称: 突触结合蛋白10抗体 0.2ml
Scavenger Receptor BII 英文名称: 清道夫受体B2抗体 0.2ml
Sox9a 英文名称: 转录因子sox9a抗体 0.2ml
SGK3 英文名称: 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Sgk3抗体 0.2ml
SLPI 英文名称: 分泌型白细胞蛋白酶抑制因子抗体 0.2ml
2,4-D(24D1) 英文名称: 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体 0.1ml
SLC14A1 英文名称: 尿素转运型糖蛋白抗体 0.2ml
SLTM 英文名称: 雌激素诱导的转录调制器抗体 0.1ml
14-3-3 Alpha + Beta + Gamma + Delta + Epsilon 英文名称: 14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亚型抗体 0.1ml
2,4-D 英文名称: 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体 0.2ml
5-HTR1A 英文名称: 5-羟色胺受体1A抗体 0.1ml
5-HT/5 Hydroxy Tryptophan 英文名称: 5羟色胺抗体 0.1ml
5-HTR1B 英文名称: 5-羟色胺受体1B抗体 0.1ml
Synapsin II 英文名称: 神经突触素2抗体 0.2ml
RNF142 英文名称: 环指蛋白142抗体 0.2ml
SYT3 英文名称: 突触结合蛋白3抗体 0.1ml
NCI-H3255 细胞SNAP25 英文名称: 突触相关蛋白25抗体 0.1ml
SOCS1 英文名称: 细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体 0.1ml
SOD1 英文名称: 氧化物歧化酶1抗体(铜/锌过氧化物歧化酶SOD) 0.1ml
SOD2 英文名称: 氧化物歧化酶2抗体 0.1ml
Somatostatin 28 英文名称: 生长抑素抗体 0.1ml
SOX2 英文名称: 胚胎干细胞关键蛋白抗体 0.1ml
SSTR4 英文名称: 生长抑素受体4抗体 0.1ml
Smad4 英文名称: Smad4抗体 0.1ml
Smad7 + Smad6 英文名称: Smad7抗体 0.1ml
Shh 英文名称: Shh信号转导通路膜蛋白受体抗体 0.1ml
STEAP1 英文名称: 前列腺跨膜上皮1抗原抗体 0