RT4-D6P2T细胞

发布时间:2021-08-30

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英文简称:RT4-D6P2T细胞
产品名称:大鼠神经许旺细胞
规格:T25
形态特性:神经元 
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:DMEM(高糖)+10%FBS

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

SLC27A5 脂肪酸转运蛋白5抗体
SNX25 分拣微管连接蛋白抗体
SERPINA10 丝氨酸蛋白酶抑制剂A10抗体
SERPINB1 丝氨酸蛋白酶抑制剂B1抗体
SERPINB11 丝氨酸蛋白酶抑制剂B11抗体
SERPINB3 丝氨酸蛋白酶抑制剂B3抗体
SNF1LK2 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK2抗体
Septin 3 神经元特异性蛋白3抗体
pig cholerae salmonella 猪霍乱沙门氏菌抗体
PIG54 细胞增殖诱导蛋白54抗体
Salmonella 沙门氏菌抗体(多型)
Salmonella typhimurium 鼠伤寒沙门氏菌
Salmonella paratyphi a 甲型副伤寒沙门氏菌抗体
SRRM1 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白1抗体
SRRM2 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白2抗体
Duck salmonella 鸭沙门氏菌抗体
2-Dec 转录调节因子DEC2抗体
SPHK2 鞘氨醇激酶2抗体
STK3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3抗体
Streptavidin 链酶亲和素抗体
SLN 肌脂蛋白抗体
SEN1 细胞衰老相关蛋白1抗体
Spermine synthase 精胺合成酶抗体
SLC39A11 溶质载体家族39成员11抗体
p70 S6 kinase beta 核糖体蛋白S6激酶1抗体
SCNN1D 上皮钠离子通道蛋白D/δENaC抗体
Sorcin 抗药蛋白抗体
SPP24 分泌性磷蛋白24抗体
SORCS3 液泡蛋白分选受体SORCS3抗体
SOSSC 单链DNA结合蛋白相互作用蛋白1
SLC40A1 细胞膜铁转运蛋白FP1抗体
pan 14-3-3 14-3-3蛋白抗体
Synaptotagmin X 突触结合蛋白10抗体
Scavenger Receptor BII 清道夫受体B2抗体
RT4-D6P2T细胞Sox9a 转录因子sox9a抗体
SGK3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Sgk3抗体

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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