OE-33细胞

发布时间:2021-08-30

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英文简称:OE-33细胞
产品名称:食管癌细胞
规格:T25
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:RPMI 1640 + 2mM Glutamine +10% FBS

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

phospho-ZCWCC1 (Ser739) 磷酸化ZCWCC1抗体
ZNF598 锌指蛋白598抗体
ZNF537 锌指蛋白537抗体
ZSWIM3 ZSWIM3蛋白抗体
ZSWIM2 E3泛素蛋白连接酶ZSWIM2抗体
ZNRF4 锌指/环指蛋白4抗体
ZNF828 锌指蛋白828抗体
ZO-1 胞质紧密粘连蛋白1抗体(闭锁小带蛋白1)
ZIP Kinase 凋亡相关蛋白激酶3抗体
ZNF211 锌指蛋白211抗体
ZNF749 锌指蛋白749抗体
phospho-ZAP70 (Tyr292) 磷酸化zeta相关蛋白70抗体
Z DNA binding protein Z DNA结合蛋白抗体
ZADH1 锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体
ZBTB26 锌指蛋白481抗体
ZBTB34 锌指蛋白ZBTB34抗体
ZBTB43 锌指蛋白297B抗体
ZBTB46 锌指蛋白340抗体
ZBTB48 锌指蛋白855抗体
ZBTB5 锌指蛋白ZBTB5抗体
ZBTB6 锌指蛋白ZBTB6抗体
ZBTB7C 锌指蛋白ZBTB7C抗体
ZBTB8A 锌指蛋白ZBTB8A抗体
ZBTB8B 锌指蛋白916B抗体
ZBTB4 锌指蛋白903抗体
ZBTB40 锌指蛋白923抗体
ZNF288 锌指蛋白288抗体
ZNF185 锌指蛋白185抗体
ZNF431 锌指蛋白431抗体
ZNF379 锌指蛋白379抗体
ZNF804A 锌指蛋白804A抗体
ZNF693 锌指蛋白693抗体
ZBTB3 锌指蛋白ZBTB3抗体
ZWILCH 着丝粒ZWILCH蛋白抗体
ZFP57 锌指蛋白57抗体
ZNF717 锌指蛋白717抗体
ZDHHC7 锌指蛋白370抗体
ZNF3 锌指蛋白3抗体
ZNF423 锌指蛋白423抗体
OE-33细胞ZNF239 锌指蛋白239抗体
ZNF426 锌指蛋白426抗体
phospho-ZNF598(Tyr306) 磷酸化锌指蛋白598抗体
ZNF423 锌指蛋白423抗体
zinc finger protein 830 锌指蛋白830抗体
ZAR1L 受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体



细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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