本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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猪链球菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63393 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
巨噬激蛋白检测试剂盒硫酸亚铁，七水 99.99%
加氧血红素酶-1检测试剂盒硫酸亚铁，七水 ACS, ≥99.0%1-氯代正戊烷 99%Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465) 磷酸化信号转导分子Smad-1/5抗体
21羟化酶检测试剂盒硫酸亚铁，七水 for plant cell culture, ≥99%环戊乙酸 98%Anti-Smad2/3 信号转导分子Smad-2/3抗体
21羟化酶检测试剂盒柠檬酸 CP,99.0%1,4-二氯丁烷 98%Anti-phospho-Smad2(Ser465) 磷酸化Smad2抗体
肺表面活性蛋白检测试剂盒钠石灰 医用级，红色2-羟基-4-甲氧基苯甲 98%Anti-Smad4 Smad4抗体
检测试剂盒钠石灰(带指示剂) ACS2-甲氧基苯甲 98%Anti-Smad7 Smad 7抗体
循环肿瘤检测试剂盒钠石灰 CP2-烯酰氨基-2-甲基-1-烷磺酸 98%Anti-phosphor-SMAD2 (Ser425) 磷酸化信号转导分子SMAD2抗体
四环素类检测试剂盒乙酸钠，三水 CP,98%肼甲酸苄酯 98%Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467) 磷酸化信号转导分子SMAD2抗体
骨膜蛋白检测试剂盒酸铵 AR,97%5-氯茚酮 97%Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255) 磷酸化信号转导分子SMAD2抗体
磷酸化信号转导分子SMAD-3检测试剂盒分散黄39 分析标准品4-二甲氨基吡啶 99%Anti-Smad3 信号转导分子SMAD3抗体
磷酸化信号转导分子SMAD-4检测试剂盒N,N-二甲基对苯二 98%异烟酸 AR,99%Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) 磷酸化信号转导分子SMAD3抗体
脱氧血红蛋白检测试剂盒N,N-二甲基对苯二 90%异烟碱 99%Anti-SMC1 染色体结构维持蛋白质１抗体
氧合血红蛋白检测试剂盒2-溴乙氢盐 98%肼甲酸甲酯 97%Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体
二型高密度脂蛋白检测试剂盒2-二乙氨基氯乙烷盐酸盐 99%三氯 AR,99.0%(易制品)Anti-Phospho-SMC1 (Ser957) 磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体
三型高密度脂蛋白检测试剂盒5-氯水杨酸 99%二氯 CP,99.0%Anti-SM-MHC 心肌肌凝蛋白抗体
猪链球菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FUT8 ELISA Kit磷酸化促凋亡Bik蛋白抗体
人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FUT9 ELISA Kit蛋白酪氨酸激酶BAP135抗体
人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FUT7 ELISA Kit磷酸化相关死亡促进因子抗体
人可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FRZB ELISA Kit磷酸化Bax抗体
人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FSD1L ELISA KitBcl-10抗体
人骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FUT4 ELISA Kit原癌基因Bcl-6抗体
人血栓烷受体(TP/TXA2R)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FSCN3 ELISA Kit磷酸化Bcl-10抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
