本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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猪疱疹病毒 I 型、伪狂犬病病毒染料法荧光定量试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63491 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
氨基乙二酸半合酶检测试剂盒磺氯吡 分析标准品N,N-二 AR,99%Anti-phospho-eIF4E(pSer209)/FITC 荧光素标记磷酸化eIF-4E(Ser209)抗体IgG
Ca-ATP酶检测试剂盒磺吡啶 分析标准品AR,99%Anti-HBA1/Gold 金标记抗人血红蛋白α1抗体IgG
肠道腺病检测试剂盒西玛津 分析标准品氨基磺酸 AR,99.5%Anti-Elastin/FITC 荧光素标记抗弹性蛋白抗体IgG
星状病抗原检测试剂盒噻苯隆 分析标准品2,4-二氯苯 99%Anti-ELAVL1/HuR/FITC 荧光素标记ELAVL1抗体IgG
Toll样受体衔接分子1检测试剂盒盐酸四环素 分析标准品2,4-二氯苯肼盐酸盐 99%Anti-Elastin/Gold 金标记抗弹性蛋白抗体IgG
汉坦病检测试剂盒诱虫烯 分析标准品乙烷磺酸 90%Anti-ELK1/FITC 荧光素标记转录因子ELK1抗体IgG
Toll样受体衔接分子1检测试剂盒草达津 分析标准品磺酰氯 99.5%(剧品)Anti-Endo G /FITC 荧光素标记核酸内切酶G抗体IgG
β-神经生长因子检测试剂盒四苯基锡 分析标准品硫酸多粘菌素B USP级,≥6,000 USP units/mgAnti-Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化转录因子ELK1抗体IgG
内消旋肌单核苷酸酶脱氢酶2检测试剂盒苯磺隆 分析标准品,95%四苯钠 99.5%Anti-Emp1/FITC 荧光素标记表皮膜蛋白1抗体IgG
钙联接蛋白检测试剂盒吡螨 分析标准品二正辛 97%Anti-Endostatin/FITC 荧光素标记内皮抑素/内皮他丁抗体IgG
甲状旁腺激素相关蛋白检测试剂盒灭菌唑 分析标准品,99.2%4,4-二甲氧基-2-丁酮 95%Anti-envelope glycoprotein Yellow fever virus/FITC 荧光素标记抗黄热病包膜糖蛋白抗体IgG
缩酶检测试剂盒噻虫啉 分析标准品桃叶珊瑚苷 分析标准品,≥98%Anti- Beta-endorphin/FITC 荧光素标记人、大、小鼠、羊、牛beta内啡肽抗体IgG
抗磷脂酰丝氨酸IgG抗体检测试剂盒唑虫酰 分析标准品,99%草乌甲素 分析标准品,≥98%Anti-ENPP1/PC-1/FITC 荧光素标记抗核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体IgG
抗磷脂酰丝氨酸IGM抗体检测试剂盒氯乙烯标准溶液1000ng/ul,溶剂:甲千金藤素 分析标准品,≥98%(HPLC)Anti-EGFL7/FITC 荧光素标记抗脉管发育(组装)蛋白抗体IgG
抗磷脂酰乙IgG抗体检测试剂盒3-(4-)戊二酸 98%辣椒碱 分析标准品,≥95%(HPLC),天然Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生长因子受体抗体IgG
猪疱疹病毒 I 型、伪狂犬病病毒染料法荧光定量试剂盒人胰淀粉酶α2(AMY2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human AO-IgG(Ovary-Immunoglobulin G) ELISA Kit磷酸化周期素依赖性激酶9抗体
人胰多肽(PP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CYP7B1(Cytochrome P450 7B1) ELISA Kit磷酸化周期检测点激酶1抗体
人胰高血糖素(GC)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Aldolase B ELISA Kit磷酸化周期检测点激酶1抗体
人胰高血糖素样肽2(GLP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ZP-IgG(zona pellucida-Immunoglobulin G) ELISA Kit磷酸化抑癌基因p16抗体
人Janus激酶2(JAK2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EB-VCA-IgG(Epstein-barr virus capsid antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit磷酸化抑癌基因p16抗体
人胰腺癌标志物(CA242)酶联免疫吸附测定试剂盒Human A16-IgG(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin G) ELISA Kit磷酸化抑癌基因p16抗体
人胰腺特异性转录因子1α (PTF1α)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TA-IgG(Trophoblast antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit磷酸化CREB-1抗体
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR