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英文简称:Hepa CQ-E6细胞
产品名称:小鼠肝癌细胞
规格:T25
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:此细胞株源自C57/L小鼠中引发的BW7756肝癌;表达AFP、α1抗胰蛋白酶、淀粉酶;鼠痘病毒阴性。此细胞可以在无血清的培养基中繁殖,培养基成分是:DMEM,75%;Waymouth'sMAB87/3培养基,25%。添加3x10-8M硒。
培养条件:DMEM+10%FBS
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
Reg3 gamma 胰岛β细胞生长因子Reg IIIγ抗体
Reg3 beta 胰岛β细胞生长因子Reg IIIα 抗体
RIMKLA 核糖体蛋白S6修饰样蛋白A抗体
RFTN2 RFTN2蛋白抗体
Hepa CQ-E6细胞RNF213 环指蛋白213
RIP3 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3抗体
RIP5 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶5抗体
RBM15 RNA结合蛋白15抗体
RNF47 环指蛋白47抗体
ROM1 视网膜感光细胞外节膜蛋白1抗体
RMND5B RMND5B蛋白抗体
RNF133 环指蛋白133抗体
RHBDD3 垂体瘤细胞凋亡抗体
RNF122 环指蛋白122抗体
RRAGC RAS相关GTP结合蛋白C抗体
RNF36 环指蛋白36抗体
RIP1 受体相互作用蛋白激酶1抗体
RNF7 环指蛋白7抗体
RPS3 核糖体蛋白S3抗体
RRAS 原癌基因R-Ras抗体
Phospho-Ret (Tyr905) 磷酸化指状蛋白RET抗体
RCC2 染色体浓缩调节蛋白2抗体
RACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体
Retinol binding protein 视黄醇结合蛋白抗体
RGC32 补体应答基因32抗体
RSBN1L 精子细胞碱性蛋白1样蛋白抗体
RNF144 E3泛素蛋白连接酶144A抗体
RFX4 转录调控因子RFX4抗体
RILPL2 Rab溶酶体相互作用蛋白样2抗体
RITA 12号染色体开放阅读框52抗体
Hepa CQ-E6细胞RPGRIP1L 梅克尔憩室综合征相关蛋白5抗体
Radical Fringe β1,3-N-乙酰糖基转移酶抗体
RAB3GAP1 RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位1抗体
RAB3GAP2 RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位2抗体
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。