NCI-H1770细胞

发布时间:2021-08-31

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英文简称:NCI-H1770细胞
产品名称:非小细胞肺癌细胞
规格:T25
形态特性:
生长特性:悬浮生长
特征特性:
"培养条件:ACL-4 medium serum-free
The medium for this CA-ll line is ATCC formulated DMEM: F12 Medium Catalog No. 30-2006. To make the complete growth medium, add the following components to the medium:
0.02 mg/ml insulin
0.01 mg/ml transferrin
25 nM sodium selenite final conc.
50 nM Hydrocortisone final conc.
1 ng/ml Epidermal Growth Factor do not filter
0.01 mM ethanolamine final conc.
0.01 mM phosphorylethanolamine final conc.
100 pM triiodothyronine final conc.
0.5% w/v bovine serum albumin final conc.
0.5 mM sodium pyruvate final conc.
extra 2mM L-glutamine for final conc. of 4.5mM"


一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
CRTC3 CREB调节转录激活因子3抗体
CRTAP 软骨相关蛋白CRTAP抗体
C1orf100 1号染色体开放阅读框100抗体
C1orf104 1号染色体开放阅读框104抗体
C1orf112 1号染色体开放阅读框112抗体
C1orf113 1号染色体开放阅读框113抗体
C1orf114 1号染色体开放阅读框114抗体
C1orf109 1号染色体开放阅读框109抗体
CD93 CD93抗体
C1orf110 1号染色体开放阅读框110抗体
C1ORF111 1号染色体开放阅读框111抗体
C1orf106 1号染色体开放阅读框106抗体
CYP11A1 细胞色素P450 11A1抗体
phospho-CXCR4 (Ser339) 磷酸化细胞表面趋化因子受体4抗体
phospho-CXCR2 (Ser347) 磷酸化细胞表面趋化因子受体2抗体
CEP104 中心体蛋白104抗体
CEPT1 胆碱/乙醇胺磷酸转移酶1抗体
C6orf163 6号染色体开放阅读框163抗体
C6orf165 6号染色体开放阅读框165抗体
C6orf168 6号染色体开放阅读框168抗体
C6ORF173 6号染色体开放阅读框173抗体
NCI-H1770细胞C6ORF182 6号染色体开放阅读框182抗体
C6orf186 6号染色体开放阅读框186抗体
C6orf191 6号染色体开放阅读框191抗体
C6orf195 6号染色体开放阅读框195抗体
C6ORF199 6号染色体开放阅读框199抗体
C7orf34 7号染色体开放阅读框34抗体
C6orf201 6号染色体开放阅读框201抗体
C6orf203 6号染色体开放阅读框203抗体
C6orf204 6号染色体开放阅读框204抗体
C6orf206 6号染色体开放阅读框206抗体

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