本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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幼虫芽孢杆菌PCR试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63521 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
水蛭素检测试剂盒溴甲酚紫钠盐 AR盐酸西替利 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC 荧光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG
类免疫缺陷病1抗体检测试剂盒溴百里香酚兰钠 AR5-氯氧化吲哚 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC 荧光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG
CD16分子检测试剂盒溴百里酚蓝钠盐 ACS2-(二环己基膦基)联苯 98%Anti-HO-2/FITC 荧光素标记血红素氧合酶-2抗体IgG
层粘连蛋白α5检测试剂盒2-丁酮 Standard for GC, ≥99.9% (GC)2,6-二氟-4-羟基苯 98%Anti-HOXA10 /FITC 荧光素标记HOXA10抗体IgG
烯酰-CoA异构酶检测试剂盒戊酸丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2，4-二巯基嘧啶 98%Anti-HOXB4/FITC 荧光素标记HOXB4抗体IgG
磷酸酶张力蛋白同源物检测试剂盒正丁 Standard for GC(S)-(+)-2,2-二甲基环烷甲酰 98%Anti-PSGD/HOXB13/FITC 荧光素标记同源盒蛋白HOXB13抗体IgG
2,4-二烯酰辅酶A还原酶检测试剂盒溴酚蓝钠 AR(S, S)-环己二 98%Anti-HOXc8/FITC 荧光素标记同源盒基因的一种抗体IgG
成纤维生长因子受体4检测试剂盒2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-（二乙氨基）苯酚 98%(R, R)-环己二 98%Anti-Hpt/HP /FITC 荧光素标记结合珠蛋白/触珠蛋白抗体IgG
胰岛素样生长因子结合蛋白样1检测试剂盒戊酸丁酯 ≥98.0 %N,N’-二(氨乙基)-哌 99%Anti-HPV/FITC 荧光素标记人类状瘤病抗体IgG
胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒苯 光谱级, ≥99.7%3,5-二氟苄 97%Anti-HPV16-E6/E6 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病16抗体IgG
细小病B19-IgM抗体检测试剂盒5-[(5-溴-2-吡啶)偶氮]-2，4-二氨苯 AR羟哌 97%Anti-HPV16/18 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病16/18抗体IgG
无翅型MMTV整合位点家族成员6检测试剂盒邻甲酚酞 AR,碱溶2,6-二氯苯并噻唑 98%Anti-HPV18-E6/E6 protein /FITC 荧光素标记人类状瘤病18抗体IgG
甘露糖基转移酶检测试剂盒邻甲酚酞 AR,溶6,6′-二甲基-2,2′-联吡啶 98.0 %Anti-HPV16-E7/E7 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病16-E7抗体IgG
鼠李糖基转移酶检测试剂盒偶氮氯膦Ⅰ AR,显色剂1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亚盐酸盐 98.5% Anti-H-ras/FITC 荧光素标记原癌基因H-ras抗体IgG
葡萄糖基转移酶检测试剂盒铬天青S AR2-氨基噻唑-4-甲酸乙酯 98%Anti-Hrasls3/HREV107/FITC 荧光素标记HRAS样抑制因子3抗体IgG
幼虫芽孢杆菌PCR试剂盒人类琥珀酸半脱氢酶(SSADH)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NAC-alpha(Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha) ELISA Kit肌酸磷酸激酶2抗体
人骨膜蛋白(POSTN/OSF-2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体
人基质金属蛋白酶15(MMP-15)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA Kit氯离子通道调节蛋白1A抗体
人基质金属蛋白酶14(MMP-14)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit粘蛋白-1/上皮膜抗原抗体
人低密度脂蛋白(VLDL)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA KitCWF19L1蛋白抗体
人卵磷脂胆固酰基转移酶(LCAT)酶联免疫吸附测定试剂盒Human GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit心动加速蛋白多肽抗体
人色素P450家族成员2E1(CYP2E1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA Kit通道相互作用蛋白3抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
