本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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猪托克特诺病毒1型、猪细环病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63528 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
瘤病IgM抗体 检测试剂盒二十一烷 分析标准品,≥99.5% (GC)酸 99.998%
淋巴胞浆蛋白1检测试剂盒二十一烷 >99.0%(GC)钨酸铵 99.99% (
钙调蛋白样蛋白5检测试剂盒靛蓝 AR,90%钨酸铵 AR,99%Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG
衰老关键蛋白5检测试剂盒靛红 AR仲钨酸铵 99.95 %Anti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG
光蛋白聚糖;Lumican蛋白检测试剂盒靛蓝二磺酸钠 96%,高纯级三氧化铬 AR,99%Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG
泛素特异性蛋白酶15检测试剂盒靛蓝二磺酸钠 Biological stain三氧化铬 CP,98%Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG
组织相容性复合体Ⅰ类检测试剂盒靛蓝二磺酸钠 AR,90.0%三氧化铬 ACSAnti-IL-4/FITC 荧光素标记白介素4抗体IgG
组织相容性复合体Ⅱ类检测试剂盒甲酸异丁酯 Standard for GC晶体铬酸酐 99.9%
磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域检测试剂盒衣康酸 CP,99%重铬酸钠,二水 AR,99.5%(剧品)Anti-IL-4R/FITC 荧光素标记白介素4受体抗体IgG
抗谷氨酸受体抗体检测试剂盒丁酸异戊酯 GCS,≥99.5% (GC)氮氧自由基哌啶 98%Anti-IL-5/FITC 荧光素标记白介素5抗体IgG
吡哆-5'-磷酸氧化酶检测试剂盒异丁 Standard for GC, ≥99.5% (GC)1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚 98%Anti-IL-5R Alpha/CD125/FITC 荧光素标记白介素-5受体α链抗体IgG
前表面活性物质关联蛋白B检测试剂盒乙二四乙酸锌二钠 四水合物 用于络合, ≥98%4-(二甲基氨基)肉桂 98%Anti-IL-6/FITC 荧光素标记白介素6抗体IgG
蛋白激酶Cα检测试剂盒硅藻土G TLC碱式碳酸锆(IV) ≥40% ZrO2 basisAnti-IL-6/FITC (mouse、rat) 荧光素标记白介素6抗体IgG
蛋白激酶Cβ检测试剂盒单组份卡尔费休试剂(测酮类样 2mg水/ml,测水量较小样品乙二缩双(邻氨基酚) CPAnti-IL-6/FITC 荧光素标记白介素6抗体IgG
Smad同源物5检测试剂盒硅藻土 TLC硫酸铜,五水 ACS,98.0-102.0%Anti-gp130/IL-6R /FITC 荧光素标记白介素-6受体抗体IgG
猪托克特诺病毒1型、猪细环病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒人信号肽,CUB域,EGF样1 (SCUBE1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗体
人一氧化氮(NO)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit13号染色体开放阅读框38抗体
人氧化型谷胱甘肽(GSSG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit14号染色体开放阅读框140抗体
人过氧化氢酶(CAT)ELISA kitHuman VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit阳离子转运调节样蛋白2抗体
人胆汁酸(TBA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit15号染色体开放阅读框62抗体
人谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit15号染色体开放阅读框41抗体
人胎盘生长因子(PGF) 酶联免疫吸附测定试剂盒Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗体
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR