实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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人类嗜T淋巴细胞病毒2型RT-PCR试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63673 |
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
果糖-1,6-二磷酸缩酶检测试剂盒2-羟基茴香硫 98%3,3’-二没食子酸酯茶黄素 分析标准品, ≥98.0% (HPLC)Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1 免疫球蛋白结合蛋白-1
景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶检测试剂盒4-甲基茴香硫 99%盐酸拓扑替康 分析标准品，≥99%(HPLC)CD133 Anti-gen 造血干抗原（多肽抗原）
β-碳酸酐酶检测试剂盒4-甲硫基苯 98%单宁酸 ARc-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白（抗原）
β-樱草糖苷酶检测试剂盒4-甲硫基苄 98%丹参酮IIA 98%ChAT(Choline Acetyltransferase) 胆碱乙酰转移酶（抗原）
Δ12-脂肪酸去饱和酶检测试剂盒4-甲硫基氯苄 97%雷公藤乙素 分析标准品，≥98%ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 蕈碱型乙酰胆碱受体（抗原）
β-酮脂酰ACP合成酶检测试剂盒4-甲硫基苯乙酮 97%射干苷 分析标准品，>98% C-Peptide( C-PEP ) C-肽（C肽）
精氨酸合成酶检测试剂盒2-甲硫基苯甲酸 98%花旗松素 分析标准品，≥98%CR (Calretinin) 钙结合蛋白（抗原）
阿魏酰辅酶A邻羟基酶检测试剂盒4-甲硫基 98%3,3′,5′-三-L-甲状腺原氨酸 97%CRP (C-reactive protin) C-反应蛋白（抗原）
碳酸酐酶检测试剂盒3-并噻吩 96%熊果酸 93%ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3) 腺苷受体A3抗原
血清素检测试剂盒3-并噻吩-2-羧酸 97%熊去氧胆酸 99%Integrin AlphaV (Integrin alpha V) 巨噬来源的趋化因子αV抗原
铵转运蛋白检测试剂盒2-巯基吡啶 98%硫酸长春碱 ≥97%(HPLC)CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 环腺苷酸应答元件结合蛋白（抗原）
蛋白质水解酶检测试剂盒3-甲氧基二苯 98%文多灵 ≥98.0% (HPLC)phospho-CREB-1 磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白（多肽）
番茄黄叶曲叶病检测试剂盒2-并噻唑 98%硫酸长春新碱 98%ADRA2 peptide 肾上腺素能受体2抗原
葡萄糖二磷酸尿苷检测试剂盒4-甲氧基硫代苯甲酰 98%辣椒素 97%CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮质激素释放因子
β-淀粉酶检测试剂盒4-甲基硫代氨基脲 97%牡荆素 分析标准品，≥98%CT (Calcitonin ) 降钙素（抗原）
人类嗜T淋巴细胞病毒2型RT-PCR试剂盒小鼠固类生成因子1(SF1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体
小鼠固调节元件结合蛋白(SREBP))酶联免疫吸附测定试剂盒Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit20号染色体开放阅读框62抗体
小鼠基质衍生因子1(SDF1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human DDAH2(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2) ELISA Kit凋亡抑制因子1抗体
小鼠基质衍生因子1β(SDF-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HIG2(Hypoxia-inducible gene 2 protein) ELISA Kit20号染色体开放阅读框27抗体
小鼠基质衍生因子2(SDF2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SYP(Synaptophysin) ELISA Kit酯酶抑制蛋白C1IN抗体
小鼠基质衍生因子2样蛋白1(SDF2L1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human BST1(ADP-ribosyl cyclase 2) ELISA Kit色素P450 2W1抗体
小鼠基质衍生因子4(SDF4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NES(Nestin) ELISA Kit胆碱脱氢酶抗体
